Циклоферон. Клиническая фармакология и терапия. Ершов Ф.И - 73 стр.

шивание воспалительного инфильтрата во всю толщу. Также по четырех-
балльной шкале измеряли и плотность васкуляризации роговицы: 0 - от-
сутствие врастания сосудов в прозрачные слои роговицы; 1 - врастание в
роговицу единичных сосудов; 2-вросшие в роговицу сосуды образуют
“венчик”, в котором дифференцируются отдельные сосуды; 3-вросшие со-
суды образуют сплошной красный “ореол” в прозрачных участках рогови-
цы.
    Аналогично описанным выше способом определяли и выраженность
острого иридоциклита: 0 - отсутствие его признаков; 1 - стушеванность ри-
сунка радужки; 2 - то же в сочетании с миозом; 3 - резко выраженное вос-
паление переднего отдела сосудистой оболочки глаза в сочетании с выпо-
том фибрина в переднюю камеру или образованием гипопиона. Оценку
воспалительных изменений конъюнктивы производили, ориентируясь на
следующие параметры: 0 - отсутствие воспалительных изменений; 1 - вос-
палительная инъекция сосудов конъюнктивы; 2 - то же в сочетании с вы-
раженной слизистым или слизисто-гнойным отделяемым из конъюнкти-
вальной полости; 3 - то же в сочетании с хемозом.
    На 4, 9, 14, 20 и 25-е сутки развития инфекции у животных брали мазки
с зараженного глаза и использовали для прямого вирусовыделения. Мате-
риал смыва разводили в 1 мл питательной среды, содержащей 1% сыворот-
ки крупного рогатого скота, 5 мкг/мл фугизона, 80 мкг/мл гентамицина и
готовили ряд разведений: от 10-1 до 10-4.
    Культуру клеток карциномы легкого человека А549 засевали в 96-
луночные планшеты по 100 мкл в лунку в концентрации 2Χ105 кл/мл и
культивировали при 370С в атмосфере 5% СО2 до образования монослоя.
    Клеточный монослой отмывали от ростовой среды раствором Хенкса и
в каждую лунку добавляли по 100 мкл соответствующих разведений ви-
русного инокулята, инкубировали 1 час при 370С в атмосфере 5 % СО2, за-
тем доводили объем до 200 мкл поддерживающей средой, содержащей 1 %
сыворотки крупного рогатого скота, 5 мкг/мл фунгизона, 80 мкг/мл гента-
мицина. На каждое разведение исследуемого материала отводилось по 4
лунки. Учет результатов проводился на 7 сутки по наличию специфическо-
го вирусного ЦПД, с определением титров вируса, вызывающих пораже-
ние клеток в культуре.
    Для выделения вируса из ткани мозга участок ствола мозга, изолиро-
ванного на 11 день после заражения, объемом 1 см3 был растерт в ступке и
разведен в 3 мл поддерживаемой среды. Материал был центрифугирован в
течение 30 мин при 6 000 об/мин, и из надосадка приготовлены серии раз-
ведений от 10-1 до 10-5.



                                                                       75