Основы экотоксикологиии. Гомбоева С.В - 12 стр.

UptoLike

Рубрика: 

23
высушивание повторить. Точность взвешивания для всех
экспериментов должна составлять 0,001 г.
3. Рассчитать значения коэффициента пересчета К
i
для каждого эксперимента по формуле:
K
t
= (M
а6c.cyx.i
- М
оi
) / (M
возд.cyx.i
- М
оi
), (2)
где Кi коэффициент пересчета в i-том измерении;
М
абс
.
cyxi
масса бюксы с абсолютно сухим образцом в i-М
измерении, г; M
возд.cyx.i
масса бюксы с воздушно-сухим
образцом в i -м измерении, г; M
oi
масса пустой бюксы в
i-м измерении, г.
4. Так как по результатам измерений получено три
значения коэффициента, производят расчет его среднего
значения (К
ср
) по формуле:
К
ср
= (К
1
+ К
2
+ К
3
) / 3. (3)
Далее среди трех величин K
t
рассчитывают размах (R)
полученных значений с учетом максимальной (Кмах) и
минимальной (Kmin) величин по формуле:
R = (Кмах – Kmin) / К
ср
* 100%. (4)
Если полученное значение R > 10 %, то эксперимент
повторяют, устранив причины удовлетворительных ре-
зультатов.
Водную вытяжку из почвы для биотестирования го-
товят в соотношении: 1 часть почвы (с учетом гигроскопи-
ческой влажности) и 4 части культивационной воды (до-
пускается использование дистиллированной воды). Вода не
должна содержать СО
2
, так как в его присутствии раство-
ряются карбонаты кальция и магния по причине образова-
ния растворимых бикарбонатов, которые увеличивают су-
хой остаток и общую щелочность водной вытяжки и тем
самым искажают результаты биотестирования.
Для приготовления водной вытяжки из почвы отве-
шивают 100—200 г пробы почвы в воздушно-сухом со-
стоянии, пересчитав ее массу на массу абсолютно-сухой.
Масса пробы на стадии перед приготовлением водной вы-
24
тяжки должна быть достаточной для получения необходи-
мого объема экстракта при проведении биотестирования во
всех предполагаемых разведений с учетом контрольных
испытаний. Навеску почвы помещают в колбу емкостью
1000 см
3
и приливают 4-кратное количество культиваци-
онной воды.
Далее на аппарате для встряхивания жидкости полу-
ченную смесь в течение 2-х ч встряхивают, после чего от-
стаивают в течение 30 мин. Надосадочная жидкость сифо-
нируется, а затем профильтровывается через бумажные
обеззоленные фильтрыбелая лента») или через мембран-
ные фильтры с диаметром пор 3,5 мкм (фильтры предвари-
тельно промывают и кипятят в дистиллированной воде не
менее 10 мин). Бумажный фильтр помещают в воронку
Бюхнера диаметром 15—20 см.
Перед тем как вылить вытяжку на фильтр, содержи-
мое склянки или колбы встряхивают, чтобы взмутить при-
сутствующие взвешенные частицы почвы. На фильтр ста-
раются перенести всю взвесь. При выливании струю сус-
пензии направляют на боковую двойную стенку бумажного
фильтра, но не на дно фильтра, так как при выливании на
дно, бумага может легко порваться. Фильтрация осуществ-
ляется с помощью вакуумного водяного или электрическо-
го насоса. Для фильтрации применяется слабый вакуум (не
более 20 мм рт. ст.). Первые порций фильтрата часто бы-
вают мутными, и их нужно несколько раз перефильтровать
до прозрачного раствора. При повышенной мутности вод-
ной вытяжки из почв (гумусированные, дерново-
подзолистые, торфяные и др. почвы) допускается отстаи-
вание в холодильнике до 5 сут. Затем жидкость над осад-
ком сифонируется. Вытяжка из почв должна иметь; вели-
чину рН в диапазоне 7,0-8,2. При необходимости вытяжку
перед серийным разбавлением предварительно нейтрали-
зуют. После нейтрализации пробы аэрируют 10—20 мин
высушивание повторить. Точность взвешивания для всех             тяжки должна быть достаточной для получения необходи-
экспериментов должна составлять 0,001 г.                         мого объема экстракта при проведении биотестирования во
      3. Рассчитать значения коэффициента пересчета Кi           всех предполагаемых разведений с учетом контрольных
для каждого эксперимента по формуле:                             испытаний. Навеску почвы помещают в колбу емкостью
            Kt = (Mа6c.cyx.i - Моi) / (Mвозд.cyx.i - Моi), (2)   1000 см3 и приливают 4-кратное количество культиваци-
где Кi — коэффициент пересчета в i-том измерении;                онной воды.
Мабс.cyxi — масса бюксы с абсолютно сухим образцом в i-М              Далее на аппарате для встряхивания жидкости полу-
измерении, г; Mвозд.cyx.i — масса бюксы с воздушно-сухим         ченную смесь в течение 2-х ч встряхивают, после чего от-
образцом в i -м измерении, г; Moi — масса пустой бюксы в         стаивают в течение 30 мин. Надосадочная жидкость сифо-
i-м измерении, г.                                                нируется, а затем профильтровывается через бумажные
      4. Так как по результатам измерений получено три           обеззоленные фильтры («белая лента») или через мембран-
значения коэффициента, производят расчет его среднего            ные фильтры с диаметром пор 3,5 мкм (фильтры предвари-
значения (Кср) по формуле:                                       тельно промывают и кипятят в дистиллированной воде не
                  Кср = (К1 + К2 + К3) / 3.           (3)        менее 10 мин). Бумажный фильтр помещают в воронку
      Далее среди трех величин Kt рассчитывают размах (R)        Бюхнера диаметром 15—20 см.
полученных значений с учетом максимальной (Кмах) и                     Перед тем как вылить вытяжку на фильтр, содержи-
минимальной (Kmin) величин по формуле:                           мое склянки или колбы встряхивают, чтобы взмутить при-
             R = (Кмах – Kmin) / Кср * 100%.               (4)   сутствующие взвешенные частицы почвы. На фильтр ста-
      Если полученное значение R > 10 %, то эксперимент          раются перенести всю взвесь. При выливании струю сус-
повторяют, устранив причины удовлетворительных ре-               пензии направляют на боковую двойную стенку бумажного
зультатов.                                                       фильтра, но не на дно фильтра, так как при выливании на
      Водную вытяжку из почвы для биотестирования го-            дно, бумага может легко порваться. Фильтрация осуществ-
товят в соотношении: 1 часть почвы (с учетом гигроскопи-         ляется с помощью вакуумного водяного или электрическо-
ческой влажности) и 4 части культивационной воды (до-            го насоса. Для фильтрации применяется слабый вакуум (не
пускается использование дистиллированной воды). Вода не          более 20 мм рт. ст.). Первые порций фильтрата часто бы-
должна содержать СО2, так как в его присутствии раство-          вают мутными, и их нужно несколько раз перефильтровать
ряются карбонаты кальция и магния по причине образова-           до прозрачного раствора. При повышенной мутности вод-
ния растворимых бикарбонатов, которые увеличивают су-            ной вытяжки из почв (гумусированные, дерново-
хой остаток и общую щелочность водной вытяжки и тем              подзолистые, торфяные и др. почвы) допускается отстаи-
самым искажают результаты биотестирования.                       вание в холодильнике до 5 сут. Затем жидкость над осад-
      Для приготовления водной вытяжки из почвы отве-            ком сифонируется. Вытяжка из почв должна иметь; вели-
шивают 100—200 г пробы почвы в воздушно-сухом со-                чину рН в диапазоне 7,0-8,2. При необходимости вытяжку
стоянии, пересчитав ее массу на массу абсолютно-сухой.           перед серийным разбавлением предварительно нейтрали-
Масса пробы на стадии перед приготовлением водной вы-            зуют. После нейтрализации пробы аэрируют 10—20 мин

                                                           23    24