ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
17
В качестве тест-объектов широко используются так-
же и микроорганизмы различных таксономических групп,
однако и сами микроорганизмы способны вырабатывать
соединения, токсичные как для высших организмов (расте-
ния, животные), так и в отношении других микрооргани-
низмов (в т.ч. микотоксины - плесневые грибы рода Fusa-
rium, Stachybotrys, Dendrodochium, выделяющие афлаток-
сины, дендродохины, миротециум, фузариум и др.
Пути развития бурно прогрессирующей химической
экотоксикологии заключаются в прослеживании всех воз-
можных маршрутов аккумуляции, биотрансформации эко-
токсикантов, выяснении множественных связей экотокси-
кантов с теми или иными видами биот, предсказании эко-
токсикологических последствий. Особенно важны количе-
ственные характеристики, касающиеся устойчивости хи-
микатов и образования продуктов их превращений в при-
родных условиях, которые получают либо в ходе монито-
ринга - отслеживания изменения концентраций отдельных
химических соединений путем систематического анализа
представительных проб воздуха, воды и почвы, либо в ре-
зультате лабораторного моделирования. Таким образом, с
развитием науки и техники методы обнаружения токсикан-
тов в окружающей среде постоянно совершенствуются.
Лабораторная работа № 1
Определение токсичности на инфузориях
Цель: Научиться определять токсичность пробы кор-
мов (продуктов) на инфузориях Тетрахимены пириформис.
Токсичность характеризует собой угнетение процес-
сов жизнедеятельности организма вплоть до его гибели.
Токсичность продукта определяется по гибели инфузории.
Предлагаемый метод также позволяет выявить отдаленные
отрицательные последствия влияния продукта на организм
18
в течение ряда поколений. Инфузория в этом отношении
представляет весьма удобный тест-объект, так как за сутки
она дает 3-8 поколений. Для сравнения напомним, что для
воспроизводства одного поколения у мухи необходимо 25-
45 дней, у мыши – 2-4, а у крысы 5-8 месяцев, у человека
25-30 лет.
Ход работы: Взятые на анализ пробы кормов (про-
дуктов) тщательно перемешивают и растирают в ступке.
Берут ряд 3-5 навесок в количествах, обратно пропорцио-
нальных предполагаемой токсичности, но не более 300 мг в
наибольшей по массе навеске. Навески вносят в пробирки
и заливают по 2 мл чистой кипяченой водой, закрывают
резиновыми пробками с вырезкой для доступа воздуха, что
предотвращает выбрасывание пробок при нагревании про-
бирок. Прогревают в водяной бане (или стерилизаторе) 15-
20 мин при температуре 80-90
0
С. После охлаждения до
комнатной температуры в пробирки вносят по 0,05 мл
культуры Тетрахимены пириформис, разведенной перед
этим водой в 10 раз, затем помещают их в обычный шкаф
(в затемненное место) при комнатной температуре на 1-4
сут.
Наличие роста, его степень контролируют каждые су-
тки под микроскопом (лучше МБС-микробиологический
стериоскопический). Это позволяет просматривать пробы
прямо в пробирке, не беря их пипеткой, что является пред-
варительным контролем, за которым следует просмотр в
капле под МБИ. Каплю берут на предметное стекло пасте-
ровской или стеклянной палочкой, просматривают весь
объем, все слои. Контролем является водопроводная, де-
хлорированная путем кипячения вода, в которую одновре-
менно опытом также засевают культуру инфузорий.
Угнетение подвижности, наличие гибели, даже еди-
ничных особей или их деформации свидетельствует о ток-
сичности или другой вредности исследуемого материала.
В качестве тест-объектов широко используются так- в течение ряда поколений. Инфузория в этом отношении же и микроорганизмы различных таксономических групп, представляет весьма удобный тест-объект, так как за сутки однако и сами микроорганизмы способны вырабатывать она дает 3-8 поколений. Для сравнения напомним, что для соединения, токсичные как для высших организмов (расте- воспроизводства одного поколения у мухи необходимо 25- ния, животные), так и в отношении других микрооргани- 45 дней, у мыши – 2-4, а у крысы 5-8 месяцев, у человека низмов (в т.ч. микотоксины - плесневые грибы рода Fusa- 25-30 лет. rium, Stachybotrys, Dendrodochium, выделяющие афлаток- Ход работы: Взятые на анализ пробы кормов (про- сины, дендродохины, миротециум, фузариум и др. дуктов) тщательно перемешивают и растирают в ступке. Берут ряд 3-5 навесок в количествах, обратно пропорцио- Пути развития бурно прогрессирующей химической нальных предполагаемой токсичности, но не более 300 мг в экотоксикологии заключаются в прослеживании всех воз- наибольшей по массе навеске. Навески вносят в пробирки можных маршрутов аккумуляции, биотрансформации эко- и заливают по 2 мл чистой кипяченой водой, закрывают токсикантов, выяснении множественных связей экотокси- резиновыми пробками с вырезкой для доступа воздуха, что кантов с теми или иными видами биот, предсказании эко- предотвращает выбрасывание пробок при нагревании про- токсикологических последствий. Особенно важны количе- бирок. Прогревают в водяной бане (или стерилизаторе) 15- ственные характеристики, касающиеся устойчивости хи- 20 мин при температуре 80-900С. После охлаждения до микатов и образования продуктов их превращений в при- комнатной температуры в пробирки вносят по 0,05 мл родных условиях, которые получают либо в ходе монито- культуры Тетрахимены пириформис, разведенной перед ринга - отслеживания изменения концентраций отдельных этим водой в 10 раз, затем помещают их в обычный шкаф химических соединений путем систематического анализа (в затемненное место) при комнатной температуре на 1-4 представительных проб воздуха, воды и почвы, либо в ре- сут. зультате лабораторного моделирования. Таким образом, с Наличие роста, его степень контролируют каждые су- развитием науки и техники методы обнаружения токсикан- тки под микроскопом (лучше МБС-микробиологический тов в окружающей среде постоянно совершенствуются. стериоскопический). Это позволяет просматривать пробы прямо в пробирке, не беря их пипеткой, что является пред- Лабораторная работа № 1 варительным контролем, за которым следует просмотр в Определение токсичности на инфузориях капле под МБИ. Каплю берут на предметное стекло пасте- Цель: Научиться определять токсичность пробы кор- ровской или стеклянной палочкой, просматривают весь мов (продуктов) на инфузориях Тетрахимены пириформис. объем, все слои. Контролем является водопроводная, де- Токсичность характеризует собой угнетение процес- хлорированная путем кипячения вода, в которую одновре- сов жизнедеятельности организма вплоть до его гибели. менно опытом также засевают культуру инфузорий. Токсичность продукта определяется по гибели инфузории. Угнетение подвижности, наличие гибели, даже еди- Предлагаемый метод также позволяет выявить отдаленные ничных особей или их деформации свидетельствует о ток- отрицательные последствия влияния продукта на организм сичности или другой вредности исследуемого материала. 17 18
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 7
- 8
- 9
- 10
- 11
- …
- следующая ›
- последняя »