Основы экотоксикологиии. Гомбоева С.В - 9 стр.

UptoLike

Рубрика: 

17
В качестве тест-объектов широко используются так-
же и микроорганизмы различных таксономических групп,
однако и сами микроорганизмы способны вырабатывать
соединения, токсичные как для высших организмов (расте-
ния, животные), так и в отношении других микрооргани-
низмов (в т.ч. микотоксины - плесневые грибы рода Fusa-
rium, Stachybotrys, Dendrodochium, выделяющие афлаток-
сины, дендродохины, миротециум, фузариум и др.
Пути развития бурно прогрессирующей химической
экотоксикологии заключаются в прослеживании всех воз-
можных маршрутов аккумуляции, биотрансформации эко-
токсикантов, выяснении множественных связей экотокси-
кантов с теми или иными видами биот, предсказании эко-
токсикологических последствий. Особенно важны количе-
ственные характеристики, касающиеся устойчивости хи-
микатов и образования продуктов их превращений в при-
родных условиях, которые получают либо в ходе монито-
ринга - отслеживания изменения концентраций отдельных
химических соединений путем систематического анализа
представительных проб воздуха, воды и почвы, либо в ре-
зультате лабораторного моделирования. Таким образом, с
развитием науки и техники методы обнаружения токсикан-
тов в окружающей среде постоянно совершенствуются.
Лабораторная работа 1
Определение токсичности на инфузориях
Цель: Научиться определять токсичность пробы кор-
мов (продуктов) на инфузориях Тетрахимены пириформис.
Токсичность характеризует собой угнетение процес-
сов жизнедеятельности организма вплоть до его гибели.
Токсичность продукта определяется по гибели инфузории.
Предлагаемый метод также позволяет выявить отдаленные
отрицательные последствия влияния продукта на организм
18
в течение ряда поколений. Инфузория в этом отношении
представляет весьма удобный тест-объект, так как за сутки
она дает 3-8 поколений. Для сравнения напомним, что для
воспроизводства одного поколения у мухи необходимо 25-
45 дней, у мыши – 2-4, а у крысы 5-8 месяцев, у человека
25-30 лет.
Ход работы: Взятые на анализ пробы кормов (про-
дуктов) тщательно перемешивают и растирают в ступке.
Берут ряд 3-5 навесок в количествах, обратно пропорцио-
нальных предполагаемой токсичности, но не более 300 мг в
наибольшей по массе навеске. Навески вносят в пробирки
и заливают по 2 мл чистой кипяченой водой, закрывают
резиновыми пробками с вырезкой для доступа воздуха, что
предотвращает выбрасывание пробок при нагревании про-
бирок. Прогревают в водяной бане (или стерилизаторе) 15-
20 мин при температуре 80-90
0
С. После охлаждения до
комнатной температуры в пробирки вносят по 0,05 мл
культуры Тетрахимены пириформис, разведенной перед
этим водой в 10 раз, затем помещают их в обычный шкаф
(в затемненное место) при комнатной температуре на 1-4
сут.
Наличие роста, его степень контролируют каждые су-
тки под микроскопом (лучше МБС-микробиологический
стериоскопический). Это позволяет просматривать пробы
прямо в пробирке, не беря их пипеткой, что является пред-
варительным контролем, за которым следует просмотр в
капле под МБИ. Каплю берут на предметное стекло пасте-
ровской или стеклянной палочкой, просматривают весь
объем, все слои. Контролем является водопроводная, де-
хлорированная путем кипячения вода, в которую одновре-
менно опытом также засевают культуру инфузорий.
Угнетение подвижности, наличие гибели, даже еди-
ничных особей или их деформации свидетельствует о ток-
сичности или другой вредности исследуемого материала.
     В качестве тест-объектов широко используются так-    в течение ряда поколений. Инфузория в этом отношении
же и микроорганизмы различных таксономических групп,      представляет весьма удобный тест-объект, так как за сутки
однако и сами микроорганизмы способны вырабатывать        она дает 3-8 поколений. Для сравнения напомним, что для
соединения, токсичные как для высших организмов (расте-   воспроизводства одного поколения у мухи необходимо 25-
ния, животные), так и в отношении других микрооргани-     45 дней, у мыши – 2-4, а у крысы 5-8 месяцев, у человека
низмов (в т.ч. микотоксины - плесневые грибы рода Fusa-   25-30 лет.
rium, Stachybotrys, Dendrodochium, выделяющие афлаток-         Ход работы: Взятые на анализ пробы кормов (про-
сины, дендродохины, миротециум, фузариум и др.            дуктов) тщательно перемешивают и растирают в ступке.
                                                          Берут ряд 3-5 навесок в количествах, обратно пропорцио-
      Пути развития бурно прогрессирующей химической      нальных предполагаемой токсичности, но не более 300 мг в
экотоксикологии заключаются в прослеживании всех воз-     наибольшей по массе навеске. Навески вносят в пробирки
можных маршрутов аккумуляции, биотрансформации эко-       и заливают по 2 мл чистой кипяченой водой, закрывают
токсикантов, выяснении множественных связей экотокси-     резиновыми пробками с вырезкой для доступа воздуха, что
кантов с теми или иными видами биот, предсказании эко-    предотвращает выбрасывание пробок при нагревании про-
токсикологических последствий. Особенно важны количе-     бирок. Прогревают в водяной бане (или стерилизаторе) 15-
ственные характеристики, касающиеся устойчивости хи-      20 мин при температуре 80-900С. После охлаждения до
микатов и образования продуктов их превращений в при-     комнатной температуры в пробирки вносят по 0,05 мл
родных условиях, которые получают либо в ходе монито-     культуры Тетрахимены пириформис, разведенной перед
ринга - отслеживания изменения концентраций отдельных     этим водой в 10 раз, затем помещают их в обычный шкаф
химических соединений путем систематического анализа      (в затемненное место) при комнатной температуре на 1-4
представительных проб воздуха, воды и почвы, либо в ре-   сут.
зультате лабораторного моделирования. Таким образом, с          Наличие роста, его степень контролируют каждые су-
развитием науки и техники методы обнаружения токсикан-    тки под микроскопом (лучше МБС-микробиологический
тов в окружающей среде постоянно совершенствуются.        стериоскопический). Это позволяет просматривать пробы
                                                          прямо в пробирке, не беря их пипеткой, что является пред-
               Лабораторная работа № 1                    варительным контролем, за которым следует просмотр в
       Определение токсичности на инфузориях              капле под МБИ. Каплю берут на предметное стекло пасте-
     Цель: Научиться определять токсичность пробы кор-    ровской или стеклянной палочкой, просматривают весь
мов (продуктов) на инфузориях Тетрахимены пириформис.     объем, все слои. Контролем является водопроводная, де-
     Токсичность характеризует собой угнетение процес-    хлорированная путем кипячения вода, в которую одновре-
сов жизнедеятельности организма вплоть до его гибели.     менно опытом также засевают культуру инфузорий.
Токсичность продукта определяется по гибели инфузории.          Угнетение подвижности, наличие гибели, даже еди-
Предлагаемый метод также позволяет выявить отдаленные     ничных особей или их деформации свидетельствует о ток-
отрицательные последствия влияния продукта на организм    сичности или другой вредности исследуемого материала.

                                                    17    18