Биотехника размножения. Комлык И.П - 23 стр.

     3. Зарядка счетной камеры. Счетную камеру заряжают раз-
бавленной спермой сразу же после перемешивания. Задержка
может привести к грубым ошибкам при подсчете, так как спер-
матозоиды быстро оседают.
     Первые 2-3 капли из меланжера выпускают, чтобы удалить
раствор из капилляра, где он почти не смешивается со спермой.
Следующую каплю пускают под край притертого стекла. Капля
вследствие капиллярности втягивается под покровное стекло на
сетку, и смесь равномерно распределяется в камере. Неправильно
заряженной камеру считают в том случае, если там оказались пу-
зырьки воздуха.
     4. Подсчет спермиев. Заряженную камеру кладут на столик
микроскопа в строго горизонтальном положении. Сначала оты-
скивают сетку под малым (120 раз) увеличением, затем перево-
дят на большое (300-600 раз). В поле зрения должен помещаться
один большой квадрат сетки.
     Подождав 2-3 минуты, пока сперматозоиды осядут, присту-
пают к их подсчету. Спермии подсчитывают в 5 больших квадра-
тах (80 малых) по диагонали. Считают головки спермиев внутри
малых квадратов, а также на левых и верхних линиях.
     5. Вычисление концентрации спермиев. Результаты подсче-
та суммируют. Концентрацию определяют по формуле:
                K = (n * D * 400 * 1000) / (80 * 0,1),
     где K – концентрация спермиев (млрд.) в 1 мл спермы;
         n – количество спермиев, подсчитанных в 80 малых (5
больших) квадратах;
         D – степень разбавления спермы.
     Цифры – постоянные величины: 400 – число малых квадра-
тов на площади в 1 мм2, 1000 – число перевода на миллилитр
(мл); 80 – количество малых квадратов; 0,1 – глубина камеры
(мм).
     Для более точного определения концентрации спермиев
подсчет следует вести в обеих сетках камеры Горяева и при вы-
числении брать средний показатель. Расхождение результатов не
должно быть более 10%. Если разница превышает 10%, подсчет
                                                           23