Биотехнология. Коростелева Н.И - 124 стр.

    Второй метод – замораживание зародышей с эквилибрацией.
Зародыши насыщают в течение 10 минут в 1,4 М растворе, затем
переносят в 0,9 М раствор на 60-90 минут, после чего помещают
в пайету: раствор № 2 – воздушный пузырек – раствор № 2 с
зародышем в средине пайеты – воздушный пузырек – пробка.
Пайетту с зародышем в растворе № 2 погружают в жидкий азот
пробкой вверх до прекращения кипения, а затем переносят в
канистры и хранят до использования.
    Размораживание зародышей. Размораживают на водяной ба-
не при 370С в течение 3-5 с. При переносе пайеты из жидкого
азота в водяную баню пробку из пайеты извлекают. Зародыши
помещают в 0,5 М раствор сахарозы (к 1,7 части сахарозы до-
бавляют 10 мл среды Дюльбекко с 20% ФБС). После насыщения
сахарозой зародыши отмывают в среде Дюльбекко, содержащей
20% ФБС. Используют 4 чашки Петри; отмывают путем после-
довательного переноса с экспозицей по 5 минут.
    При трансплантации зародышей на фермах используют од-
ноэтапный метод удаления криопротектора. В этом случае при
замораживании компоненты размещают в пайете таким обра-
зом: раствор сахарозы – 0,25 мл или 0,5 мл (2/5 объема), воз-
дух – не более 5 мм, зародыш в ФБС с содержанием 1,0 М или
1,04 М раствора глицерина – 1/5 объема, воздух – 5 мм, раствор
сахарозы – 0,25 М или 0,5 М (2/5 объема).

   Задание:
   1. Изучить методы оценки качества зародышей.
   2. Изучить шкалу оценки качества зародышей.
   3. Сделать оценку изображенных на фотографиях зароды-
шей по пятибалльной системе.
   4. Изучить технологию хранения зародышей.

                  Вопросы для самоконтроля

1.   Что понимают под трансплантацией эмбрионов?
2.   Назовите этапы трансплантации.
3.   Каковы требования к донору?
4.   Каковы требования к реципиенту?
5.   Каковы методы стимуляции донора и реципиента?

                             124