ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
8
повредить слой адсорбента в месте нанесения пробы, поскольку
это может привести к деформации пятен или загрязнению посто-
ронними соединениями.
Анализируемый раствор наносят на пластинку в точку на
линии старта с помощью градуированного микрошприца или
микропипетки. Как правило, наносимый объем составляет 1-5
мм
3
(мкл). Пробу следует растворять в легко испаряющихся рас-
творителях, чтобы размер пятна на пластине был минимальным.
Применяют достаточно концентрированные пробы, поскольку
для проявления пятно должно содержать 0,5 - 10 мкг определяе-
мого вещества.
После удаления избытка растворителя пластинку помещают
в камеру для хроматографирования - плотно закрывающийся
стеклянный сосуд с плоскими стенками. Для получения воспро-
изводимых результатов хроматографирования в камере создают
атмосферу, насыщенную парами растворителя (подвижная фаза).
Для этого в камеру помещают, располагая вдоль стенки, фильт-
ровальную бумагу. Бумага пропитывается находящимся на дне
камеры растворителем (восходящий вариант ТСХ). Создание на-
сыщенной атмосферы необходимо для устранения "краевого эф-
фекта" - перемещения пятен, находящихся по краям пластинки со
скоростью, заметно отличающейся от скорости пятен, нанесен-
ных в середину хроматограммы.
Известно несколько вариантов ТСХ, различающихся спосо-
бом подачи растворителя. Наиболее распространенным является
восходящее элюирование. Растворитель помещают на дно хрома-
тографической камеры, нижний край пластинки с нанесенными
пробами медленно пропитывается подвижной фазой. Фронт хро-
матографирования перемещается снизу вверх.
Нисходящий вариант ТСХ применяют в анализе проб, ком-
поненты которых медленно перемещаются по слою (аминокисло-
ты). Растворитель подают на пластинку из специального устрой-
ства сверху. К капиллярным силам добавляется сила гравитации.
Таким способом достигается лучшее разделение, чем при восхо-
дящем элюировании.
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
повредить слой адсорбента в месте нанесения пробы, поскольку
это может привести к деформации пятен или загрязнению посто-
ронними соединениями.
Анализируемый раствор наносят на пластинку в точку на
линии старта с помощью градуированного микрошприца или
микропипетки. Как правило, наносимый объем составляет 1-5
мм3(мкл). Пробу следует растворять в легко испаряющихся рас-
творителях, чтобы размер пятна на пластине был минимальным.
Применяют достаточно концентрированные пробы, поскольку
для проявления пятно должно содержать 0,5 - 10 мкг определяе-
мого вещества.
После удаления избытка растворителя пластинку помещают
в камеру для хроматографирования - плотно закрывающийся
стеклянный сосуд с плоскими стенками. Для получения воспро-
изводимых результатов хроматографирования в камере создают
атмосферу, насыщенную парами растворителя (подвижная фаза).
Для этого в камеру помещают, располагая вдоль стенки, фильт-
ровальную бумагу. Бумага пропитывается находящимся на дне
камеры растворителем (восходящий вариант ТСХ). Создание на-
сыщенной атмосферы необходимо для устранения "краевого эф-
фекта" - перемещения пятен, находящихся по краям пластинки со
скоростью, заметно отличающейся от скорости пятен, нанесен-
ных в середину хроматограммы.
Известно несколько вариантов ТСХ, различающихся спосо-
бом подачи растворителя. Наиболее распространенным является
восходящее элюирование. Растворитель помещают на дно хрома-
тографической камеры, нижний край пластинки с нанесенными
пробами медленно пропитывается подвижной фазой. Фронт хро-
матографирования перемещается снизу вверх.
Нисходящий вариант ТСХ применяют в анализе проб, ком-
поненты которых медленно перемещаются по слою (аминокисло-
ты). Растворитель подают на пластинку из специального устрой-
ства сверху. К капиллярным силам добавляется сила гравитации.
Таким способом достигается лучшее разделение, чем при восхо-
дящем элюировании.
8
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 6
- 7
- 8
- 9
- 10
- …
- следующая ›
- последняя »
