ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
Параметры удерживания какого либо соединения в смеси при определенных условиях характери-
зуют природу этого соединения и могут быть использованы для целей идентификации.
9.7 Расчет содержания определяемого
вещества
На практике применяют преимущественно следующие методы расчета содержания определяемых
компонентов в хроматографируемых смесях: абсолютной градуировки (калибровки), внутренней нор-
мализации и внутреннего стандарта. Все методы основаны на измерении параметров пиков на хромато-
грамме, а именно: их площади или высоты. Чаще всего измеряют площади пиков.
Площадь каждого пика на хроматограмме рассчитывают вручную при условии, что сигнал детекто-
ра должен быть пропорционален концентрации вещества, а пик – симметричен. Существуют различные
способы определения площади пика:
– расчет площади пика осуществляют как произведение его высоты на полуширину. При идеаль-
ной форме пика (гауссова кривая) таким путем учитывается 94 % фактической площади. Однако дан-
ным способом нельзя определять площадь низких пиков с большим основанием, а при оценке асиммет-
ричных пиков возникают большие ошибки:
– способ электронного интегрирования (методы планиметрии). Этот метод имеет целый ряд пре-
имуществ, в частности, удобен при анализе сложного профиля элюирования (серийные анализы), ис-
ключает субъективную оценку и позволяет не проводить коррекцию базовой линии. Он позволяет авто-
матизировать последующие операции: определение начала пика; окончания пика: положения максиму-
ма, площади пика; коррекцию базовой линии (дрейф); получение сведений о положении пика на профи-
ле элюирования.
Для всех способов расчета необходимо вводить поправочные коэффициенты, специфические для
каждой группы веществ, которые приводятся в специальных таблицах.
9.8 Эффективность хроматографического
разделения
В процессе хроматографирования вещество, перемещаясь вдоль слоя сорбента, распределяется ме-
жду подвижной и неподвижной фазами. При этом зона вещества размывается. Чем больше размывание
зон двух соседних компонентов, тем труднее их разделить. Мерой размывания хроматографической зо-
ны является высота, эквивалентная теоретической тарелке (ВЭТТ или Н).
Для колоночной хроматографии число теоретических тарелок N рассчитывают по формулам
2
5,0
54,5
µ
⋅=
R
t
N
; (9.3)
2
16
µ
⋅=
R
t
N
. (9.4)
Тогда
N
L
=ВЭТТ
, (9.5)
где L – длина колонки, мм.
Чем меньше ВЭТТ, тем эффективнее работает колонка, тем более узкими становятся пики на хро-
матограмме.
9.9 КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ РАЗДЕЛЕНИЯ
Для количественной оценки хроматографического разделения используют критерии, характери-
зующие качество разделения в зависимости от параметров опыта – природы сорбента, температуры
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 124
- 125
- 126
- 127
- 128
- …
- следующая ›
- последняя »
