Изучение биологических объектов методами атомно-силовой микроскопии. Нагорнов Ю.С. - 51 стр.

UptoLike

Составители:

Рубрика:

2.6 Влияние фемтосекундного лазерного излучения на клетки крови

Изменение формы эритроцитов может возникать вследствие внешних физико-химических

воздействий, т. е. клетки могут подвергаться различным обратимым и необратимым

трансформациям. В крови млекопитающих в норме абсолютное большинство эритроцитов (до

97%) представляют собой дискоцитарные, с гладкой поверхностью, диаметром 6,5—8 мкм.

Хорошо известным примером обратимой деформации эритроцитов является переход от

дискоцита к эхиноциту. Понимание механизмов деформации эритроцитов важно для

представления о структурной организации и динамическом состоянии мембранных белков и

липидов и факторах окружающей среды, которые могут влиять на свойства и целостность

мембраны [25].

Когда эритроцит кладут под покровное стекло для исследования методами АСМ

микроскопии, наблюдается изменение его формы: двояковогнутый диск покрывается

выростами. Такой вид эритроцита получил название эхиноцита. Это обратимая форма, и если

отмытые эритроциты поместить в нормальную свежую плазму они опять примут дискоидную

форму. Трансформация дискоцит - эхиноцит начинается с нарушения контура двояковогнутой

структуры эритроцита с последующим появлением грубых выростов сначала по окружности

диска, а затем по всей поверхности клетки, после чего эритроцит принимает в основном

сферическую форму. Трансформация эхиноцита обратима до стадии потери мембранного

вещества и не зависит от объема.

Образование стоматоцита - это другой вариант трансформации эритроцита. Клетки

становятся похожими на «открытый рот». Агенты, вызывающие трансформацию дискоцита в

стоматоцит, это непроникающие анионы, либо катионные амфиофилы. Следует заметить, что

как определенная концентрация стоматоцитогенного или эхиноцитогенного агента, так и

специфический рН ведут к гетерогенным изменениям формы в популяции эритроцитов, что

указывает на определенную роль исходного состояния мембраны в специфике внутренних

факторов [26-47].

В работах [25,26] под руководством проф. Генинг Т.П. было проведено исследование

влияния фемтосекундного низкоинтенсивного лазерного излучения на морфологию и

состояние мембраны эритроцитов крысы. Суспензию эритроцитов разводили 1:1 0,85% NaCl.

Фемтосекундный лазер имел следующие характеристики: длительность импульса – 100 фс,

средняя мощность - 1,25 мВт, пиковая мощность – 6 кВт. Время облучения варьировалось от 1

до 10 минут с расстояния 3 и 5 см, так что доза облучения составляла от 27 до 480 мДж/с.