Полевой практикум по водной микробиологии и гидрохимии. Намсараев Б.Б - 45 стр.

UptoLike

Рубрика: 

45
1 2 3
Выявление и учет
водорослей и
микромицетов
Вода
Осадки,
мат
Фильтрация, высушивание
Фиксация этанолом (1:2)
Выявление и учет
эпифитных бактерий
Растения,
камни
Посев на элективные среды
Соскоб с 1-5 см
2
поверхности растений или
камня, хранение на холоду и
темноте
6.1. Изучение микробного пейзажа
Структуру микробного сообщества в воде, осадках и почве
изучают при помощи стекол обрастания.
Для этого обезжиренное предметное стекло помещают в воду,
осадки и почву от 1 до 10 суток в зависимости от активности
микроорганизмов и экспедиционных условий. Затем снимают и
высушивают. При транспортировке беречь одну сторону стекла от
механического повреждения. В лаборатории одну сторону
очищают, на второй стороне красят (метиленовым синим,
акридиновым оранжевым или другими красителями) микробные
клетки и под микроскопом просматривают. Для изучения
распределения клеток бактерий необходимо провести непрерывный
просмотр по профилю, что дает возможность изучения
пространственного распределения, подсчет и фотографирование
клеток.
6.2. Определение ферментативной активности
Активность
дегидрогеназы. 5-10 мл донных осадков или мата
набирают во флакон, добавляют 100 мг СаСО
3
, 5 мл 3% раствора
солянокислого 2,3,5-трифенилтетразолия и инкубируют 20 ч при
25°С. При этом дегидрогеназа восстанавливает
трифенилтетразолий до красного формазана. Краску экстрагируют
50 мл этилового спирта, раствор фильтруют и его экстинкцию
определяют в спектрофотометре при длине волны 546 нм. Значение
умножают на 1000.
          1                 2                    3
Выявление и учет        Вода        Фильтрация, высушивание
водорослей и            Осадки,     Фиксация этанолом (1:2)
микромицетов            мат
Выявление и учет        Растения,   Посев на элективные среды
эпифитных бактерий      камни       Соскоб с 1-5 см2
                                    поверхности растений или
                                    камня, хранение на холоду и
                                    темноте

              6.1. Изучение микробного пейзажа

    Структуру микробного сообщества в воде, осадках и почве
изучают при помощи стекол обрастания.
    Для этого обезжиренное предметное стекло помещают в воду,
осадки и почву от 1 до 10 суток в зависимости от активности
микроорганизмов и экспедиционных условий. Затем снимают и
высушивают. При транспортировке беречь одну сторону стекла от
механического повреждения. В лаборатории одну сторону
очищают, на второй стороне красят (метиленовым синим,
акридиновым оранжевым или другими красителями) микробные
клетки и под микроскопом просматривают. Для изучения
распределения клеток бактерий необходимо провести непрерывный
просмотр по профилю, что дает возможность изучения
пространственного распределения, подсчет и фотографирование
клеток.

        6.2. Определение ферментативной активности

    Активность дегидрогеназы. 5-10 мл донных осадков или мата
набирают во флакон, добавляют 100 мг СаСО3, 5 мл 3% раствора
солянокислого 2,3,5-трифенилтетразолия и инкубируют 20 ч при
25°С.     При       этом     дегидрогеназа     восстанавливает
трифенилтетразолий до красного формазана. Краску экстрагируют
50 мл этилового спирта, раствор фильтруют и его экстинкцию
определяют в спектрофотометре при длине волны 546 нм. Значение
умножают на 1000.




                             45