Изучение строения и методов исследования тканей животных и человека. Пешкова Е.В - 6 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ТГТУ | Тамбов

Составители: 

Рубрика: 

5
Процесс изготовления постоянного гистологического препарата
включает следующие основные этапы:
1) фиксацию материала;
2) промывку фиксированного материала;
3) обезвоживание и уплотнение материала;
4) приготовление блоков;
5) изготовление срезов (резка);
6) окрашивание срезов.
Фиксация обеспечивает предотвращение процессов разложения, что
способствует сохранению целостности структур. Это достигается тем, что
взятый из органа маленький образец либо погружают в фиксатор (спирт,
формалин, растворы солей тяжёлых металлов, осмиевая кислота, специ-
альные фиксирующие смеси), либо подвергают термической обработке.
Под действием фиксатора в тканях и органах происходит процесс необра-
тимой коагуляции белков, вследствие которого жизнедеятельность пре-
кращается, а структуры становятся мёртвыми, фиксированными. Фикса-
ция приводит к уплотнению и уменьшению объёма кусочков, а также к
улучшению последующей окраски клеток и тканей.
Из наиболее распространённых фиксаторов чаще всего применяют
следующие:
1) формалин (10…20%-ный водный раствор);
2) этиловый спирт (этанол) 80…96%-ный;
3) смесь спирта с формалином (спирт-формол): 70% этилового спир-
та 10 мл и 10…20% раствора формалина 4 мл.
Промывка материала в водопроводной проточной воде, как прави-
ло, продолжается столько же, сколько длилась фиксация, чаще 18…24 ч.
Затем фиксированные ткани и органы должны быть подготовлены для
получения срезов различного типа.
Обезвоживание и уплотнение материала необходимо для приготов-
ления срезов. Для этого материал последовательно переносят в спирты
возрастающей крепости, начиная с 70% до абсолютного (100%) включи-
тельно, т.е. проводят через батарею спиртов возрастающей крепости.
Время пребывания в каждом спирте колеблется в зависимости от характе-
ра ткани – от 4…6 до 24 ч.
Приготовление блоков производится путём пропитывания предва-
рительно обезвоженного материала парафином, целлоидином, органиче-
скими смолами. Более быстрое уплотнение достигается применением ме-
тода замораживания кусочков, например, в жидкой углекислоте.
Изготовление срезов происходит на специальных приборах – мик-
ротомах (для световой микроскопии) и ультрамикротомах (для элек-
тронной микроскопии) (рис. 1, 2).
Окрашивание срезов производится с применением методов окраски
гистологических структур, которые очень разнообразны и выбираются в
зависимости от задач исследования.

Страницы