Практикум по селекции и сортоведению плодовых и ягодных культур. Самигуллина Н.С. - 129 стр.

               Отделенную часть столбика с рыльцами помещают в каплю
         раствора метиленовой сини на предметное стекло, через 1-2 ми-
         нуты краску удаляют фильтровальной бумагой и добавляют кап-
         лю глицерина, накрывают покровным стеклом и раздавливают,
         нажимая на покровное стекло пальцем.
               При изучении прорастания пыльцы на рыльцах подсчиты-
         вают число проросших и непроросших пыльцевых зерен и опре-
         деляют процент проросших. Этот метод также имеет недостатки.
         Непроросшие зерна плохо удерживаются на рыльцах и легко
         смываются при погружении в раствор краски или в фиксирую-
         щую жидкость. По этой причине завышается процент проросших
         пыльцевых зерен по сравнению с действительностью.
               2. Метод В.С. Шардакова основан на том, что жизнеспособ-
         ная пыльца содержит в большом количестве фермент пероксида-
         зу, а поэтому легко дает окрашенное соединение при действии
         реактивов, содержащих бензидин. Нежизнеспособная пыльца не
         содержит пероксидазы, а поэтому не окрашивается.
               Для проведения исследования жизнеспособности пыльцы в
         отдельных склянках из оранжевого стекла готовят четыре рас-
         твора.
            1. 0,20 г бензидина основного в 100 мл 50%-го раствора этило-
            вого спирта;
            2. 0,15 г нафтола в 100 мл 50%-го раствора этилового спирта;
            3. 0,25 г натрия углекислого в 100 мл дистиллированной воды;
            4. 0,3% раствор перекиси водорода.
         Непосредственно перед употреблением растворы (1, 2 и 3) сме-
         шивают в небольших равных объемах. Эту смесь растворов и 4-й
         раствор наливают в отдельные капельницы.
         Пыльцу помещают на предметное стекло и пипеткой прибавляют
         каплю смеси растворов (1, 2, 3) и через одну минуту добавляют
         каплю раствора 4. Перемешивают стеклянной палочкой и накры-
         вают покровным стеклом.
         Для плодовых и ягодных растений просмотр проводится сразу
         после нанесения капли раствора 4. Если многочисленные пу-
         зырьки выделившегося кислорода будут мешать изучению пре-
         парата, то их удаляют приподнятием покровного стекла. Живая
         пыльца окрашивается в ярко-розовый или темно-красный цвет
         благодаря наличию пероксидазы, а мертвая останется бесцветной

                                                                             129
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com