Составители:
Рубрика:
Двумерная флуоресцентная микроскопия для анализа биологических образцов 56
изображения еще до его получения бывает удобно по гистограмме, которую
можно вывеси на экран.
Еще одной важной характеристикой CCD камеры является ее
светочувствительность в разных областях спектра. Обычно все они имеют
довольно высокую чувствительность в области от 350 нм до 700 нм, но
некоторые из них чувствительны также и к более коротковолновым областям
спектра, в то время как другие способны регистрировать и ИК излучения до
1000 нм и больше. При подборе тех или иных флуорохромов необходимо учесть
особенности имеющейся в вашем распоряжении камеры.
Поскольку запирающий фильтр флуоресцентного микроскопа пропускает
свет только в узкой области спектра, при регистрации мы имеем дело с
монохромным изображением. Черно-белые камеры имеют более равномерную
чувствительность в разных областях спектра и позволяют в определенных
техническими характеристиками данной камеры пределах регистрировать
свечение любого цвета практически с одинаковой эффективностью. Поэтому
для флуоресцентной микроскопии более оправдано использование черно-белых
камер. При этом, зная характеристики запирающего фильтра, полученному
изображению всегда может быть присвоен цвет, соответствующий
действительности. В случае регистрации флуоресценции нескольких
флуорохромов, последовательно устанавливаются соответствующие комплекты
фильтров, производится регистрация изображений и каждому из них
присваивается соответствующий цвет. Такая техника получила название
псевдоцветов. Несмотря на то, что в русском языке приставка «псевдо-» часто
носит отрицательный характер, в данном случае при использовании
узкополосных светофильтров она не только вполне оправдана, но и более
адекватна, чем использование цветных камер.
Использование цветных камер предпочтительно в первую очередь для
светлопольной микроскопии с применением цветных красителей и
светофильтров, а также для флуоресцентной микроскопии с использованием
комплектов фильтров, позволяющих одновременно наблюдать флуоресценцию
в разных спектрах. Камеры различаются по способу получения цветного
изображения, но в основе всегда лежит принцип разделения видимого света на
красную, зеленую и синюю составляющие. Таким образом, чувствительность
цветных камер всегда лежит только в области видимого света. Наиболее
соответствует действительности изображение, полученное камерой с
призматическим расщеплением света и тремя охлаждаемыми матрицами, но
стоимость таких систем чрезмерно высока. В тех случаях, когда используют
подвижные фильтры и цветные маски, в некоторых областях спектра даже в
пределах видимого света возникают зоны пониженной чувствительности, а это
означает снижение чувствительности метода в целом.
3.3. Методы хранения и обработки цифровых изображений
Как уже говорилось, информация с матрицы поступает в компьютер в виде
описания цветовых характеристик отдельных точек, имеющих координаты по
осям X и Y. На экране монитора мы видим реконструкцию изображения по
такому описанию. Для того, чтобы сохранить информацию с минимальными
потерями, для сохранения выбирают формат, описывающий графическую
информацию по тому же принципу, что и исходное изображение. Такие
форматы носят название растровых. В отличие от них, векторные форматы
описывают графическую информацию функциями, определяющими кривизну
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 57
- 58
- 59
- 60
- 61
- …
- следующая ›
- последняя »
