Хроматографические методы в анализе лекарственных и токсичных веществ. Стоянова О.Ф - 4 стр.

UptoLike

4
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ В ХРОМАТОГРАФИИ
Хроматография наиболее часто используемый аналитический
метод . Новейшими хроматографическими методами можно
проанализировать газообразные, жидкие и твердые вещества с
молекулярной массой от 1до 10
6
. Это могут быть изотопы водорода, ионы
металлов , полимеры , белки, нефть и др. С помощью хроматографии
получена обширная информация о строении и свойствах многих классов
органических соединений . Применение хроматографических методов для
разделения белков оказало огромное влияние на развитие современной
биохимии. Хроматографию с успехом применяют в исследовательских и
клинических целях в самых разных областях биологии и медицины , в
фармацевтике и криминалистике: для терапевтического мониторинга в
связи с ростом нелегального употребления наркотиков , идентификации
антибиотиков и отнесения их к той или иной группе антибактериальных
препаратов , для анализа отдельных наиболее важных классов пестицидов .
Такие достоинства, как универсальность, экспрессность и
чувствительность делают хроматографию важнейшим аналитическим
методом .
Хроматографический метод анализа разработан русским ботаником
М . С . Цветом в 1903 г. В первых же работах с помощью этого метода
М .С.Цвет установил, что считавшийся однородным зеленый пигмент
растений хлорофилл на самом деле состоит из нескольких веществ . При
пропускании экстракта зеленого листа через колонку, заполненную
порошком мела, и промывании петролейным эфиром он получил
несколько окрашенных зон , что, несомненно, говорило о наличии в
экстракте нескольких веществ . Впоследствии это было подтверждено
другими исследователями. Этот метод он назвал хроматографией (от греч.
хроматос”– цвет), хотя сам же указал на возможность разделения и
бесцветных веществ .
Компоненты анализируемой смеси (сорбаты ) вместе с подвижной
фазой передвигаются вдоль стационарной фазы. Ее обычно помещают в
стеклянную или металлическую трубку, называемую колонкой . В
зависимости от силы взаимодействия с поверхностью сорбента (за счет
адсорбции или по какому-либо другому механизму) компоненты будут
перемещаться вдоль колонки с разной скоростью . Одни компоненты
останутся в верхнем слое сорбента, другие , в меньшей степени
взаимодействующие с сорбентом , окажутся в нижней части колонки, а
некоторые и вовсе покинут колонку вместе с подвижной фазой , (такие
компоненты называются неудерживаемыми , а время их удерживания
определяет мертвое время” колонки). Таким образом , происходит
быстрое разделение сложных смесей компонентов . При перемещении
вдоль колонки подвижная фаза встречает на своем пути все новые и новые
слои сорбента, что обеспечивает многократность актов сорбции- десорбции
разделяемых компонентов . Этим обусловлена значительно большая
                                         4
   ТЕО РЕТИ ЧЕС КИ Е ПРЕДС ТА ВЛЕНИ Я В Х РО М АТО ГРАФ И И

        Х роматография – наиболее часто использ уемы й аналитический
метод .       Н ов ейш ими      хроматог рафическим и       метод ами         можно
проанализ иров ать г     аз ообраз ны е, жид кие и тв ерд ы е в ещ еств а с
молекуля рной массой от1д о106 . Э томогутбы тьиз отопы в од ород а, ионы
металлов , полимеры , белки, нефть и д р. С помощ ью хроматог                  рафии
получена обш ирная информация остроении и св ойств ах м ног             их классов
орг  анических соед инений. П рименение хроматографических метод ов д ля
раз д еления белков оказ ало ог     ромное в лия ние на раз в итие сов ременной
биохимии. Х роматографию с успехом применя ют в исслед ов ательских и
клинических целя х в сам ы х раз ны х областя х биолог        ии и мед ицины , в
фармацев тике и крим иналистике: д ля терапев тическог           о мониторинг    ав
св я з и с ростом нелег    ального употребления наркотиков , ид ентификации
антибиотиков и отнесения их к той или иной группе антибактериальны х
препаратов , д ля анализ а отд ельны х наиболее в ажны х классов пестицид ов .
Т акие       д остоинств а,    как     унив ерсальность,      э кспрессность       и
чув ств ительность д елают хроматог       рафию в ажнейш им аналитическим
метод ом.
        Х роматографический метод анализ а раз работан русским ботаником
М .С. Ц в етом в 1903 г. В перв ы х же работах с помощ ью э того метод а
М .С.Ц в ет установ ил, что считав ш ийся од нород ны м з елены й пигмент
растений хлорофилл на самом д еле состоит из нескольких в ещ еств . П ри
пропускании э кстракта з еленог        о листа через колонку, з аполненную
порош ком мела, и промы в ании петролейны м э фиром он получил
несколько окраш енны х з он, что, несомненно, гов орило о наличии в
э кстракте нескольких в ещ еств . В послед ств ии э то бы ло под тв ержд ено
д руг  им и исслед ов ателя ми. Э тотметод он наз в алх рома т огра ф и е й (отг реч.
“ хроматос”– цв ет), хотя сам же указ ал на в озможность раз д еления и
бесцв етны х в ещ еств .
        К омпоненты анализ ируемой смеси (сорбаты ) в месте с под в ижной
фаз ой перед в игаются в д оль стационарной фаз ы . Е е обы чно помещ ают в
стекля нную или металлическую трубку, наз ы в аемую колонкой. В
з ав исимости от силы в з аимод ейств ия с пов ерхностью сорбента (з а счет
ад сорбции или по каком у-либо д руг       ому механиз м у) компоненты буд ут
перемещ аться в д оль колонки с раз ной скоростью. О д ни ком поненты
останутся в в ерхнем слое сорбента, д руг            ие, в меньш ей          степени
в з аимод ейств ующ ие с сорбентом, окажутся в нижней части колонки, а
некоторы е и в ов се покинут колонку в месте с под в ижной фаз ой, (такие
компоненты наз ы в аются не уде рж и ва е мы ми , а в рем я их уд ержив ания
опред еля ет “ мертв ое в ремя ” колонки). Т аким образ ом, происход ит
бы строе раз д еление сложны х смесей компонентов . П ри перемещ ении
в д ольколонки под в ижная фаз ав стречаетнасв оем пути в се нов ы е и нов ы е
слои сорбента, чтообеспечив аетмног       ократностьактов сорбции-д есорбции
раз д еля емы х компонентов . Э тим обуслов лена з начительно больш ая