ВУЗ:
Рубрика:
4
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ В ХРОМАТОГРАФИИ
Хроматография – наиболее часто используемый аналитический
метод . Новейшими хроматографическими методами можно
проанализировать газообразные, жидкие и твердые вещества с
молекулярной массой от 1до 10
6
. Это могут быть изотопы водорода, ионы
металлов , полимеры , белки, нефть и др. С помощью хроматографии
получена обширная информация о строении и свойствах многих классов
органических соединений . Применение хроматографических методов для
разделения белков оказало огромное влияние на развитие современной
биохимии. Хроматографию с успехом применяют в исследовательских и
клинических целях в самых разных областях биологии и медицины , в
фармацевтике и криминалистике: для терапевтического мониторинга в
связи с ростом нелегального употребления наркотиков , идентификации
антибиотиков и отнесения их к той или иной группе антибактериальных
препаратов , для анализа отдельных наиболее важных классов пестицидов .
Такие достоинства, как универсальность, экспрессность и
чувствительность делают хроматографию важнейшим аналитическим
методом .
Хроматографический метод анализа разработан русским ботаником
М . С . Цветом в 1903 г. В первых же работах с помощью этого метода
М .С.Цвет установил, что считавшийся однородным зеленый пигмент
растений хлорофилл на самом деле состоит из нескольких веществ . При
пропускании экстракта зеленого листа через колонку, заполненную
порошком мела, и промывании петролейным эфиром он получил
несколько окрашенных зон , что, несомненно, говорило о наличии в
экстракте нескольких веществ . Впоследствии это было подтверждено
другими исследователями. Этот метод он назвал хроматографией (от греч.
“хроматос”– цвет), хотя сам же указал на возможность разделения и
бесцветных веществ .
Компоненты анализируемой смеси (сорбаты ) вместе с подвижной
фазой передвигаются вдоль стационарной фазы. Ее обычно помещают в
стеклянную или металлическую трубку, называемую колонкой . В
зависимости от силы взаимодействия с поверхностью сорбента (за счет
адсорбции или по какому-либо другому механизму) компоненты будут
перемещаться вдоль колонки с разной скоростью . Одни компоненты
останутся в верхнем слое сорбента, другие , в меньшей степени
взаимодействующие с сорбентом , окажутся в нижней части колонки, а
некоторые и вовсе покинут колонку вместе с подвижной фазой , (такие
компоненты называются неудерживаемыми , а время их удерживания
определяет “мертвое время” колонки). Таким образом , происходит
быстрое разделение сложных смесей компонентов . При перемещении
вдоль колонки подвижная фаза встречает на своем пути все новые и новые
слои сорбента, что обеспечивает многократность актов сорбции- десорбции
разделяемых компонентов . Этим обусловлена значительно большая
4 ТЕО РЕТИ ЧЕС КИ Е ПРЕДС ТА ВЛЕНИ Я В Х РО М АТО ГРАФ И И Х роматография – наиболее часто использ уемы й аналитический метод . Н ов ейш ими хроматог рафическим и метод ами можно проанализ иров ать г аз ообраз ны е, жид кие и тв ерд ы е в ещ еств а с молекуля рной массой от1д о106 . Э томогутбы тьиз отопы в од ород а, ионы металлов , полимеры , белки, нефть и д р. С помощ ью хроматог рафии получена обш ирная информация остроении и св ойств ах м ног их классов орг анических соед инений. П рименение хроматографических метод ов д ля раз д еления белков оказ ало ог ромное в лия ние на раз в итие сов ременной биохимии. Х роматографию с успехом применя ют в исслед ов ательских и клинических целя х в сам ы х раз ны х областя х биолог ии и мед ицины , в фармацев тике и крим иналистике: д ля терапев тическог о мониторинг ав св я з и с ростом нелег ального употребления наркотиков , ид ентификации антибиотиков и отнесения их к той или иной группе антибактериальны х препаратов , д ля анализ а отд ельны х наиболее в ажны х классов пестицид ов . Т акие д остоинств а, как унив ерсальность, э кспрессность и чув ств ительность д елают хроматог рафию в ажнейш им аналитическим метод ом. Х роматографический метод анализ а раз работан русским ботаником М .С. Ц в етом в 1903 г. В перв ы х же работах с помощ ью э того метод а М .С.Ц в ет установ ил, что считав ш ийся од нород ны м з елены й пигмент растений хлорофилл на самом д еле состоит из нескольких в ещ еств . П ри пропускании э кстракта з еленог о листа через колонку, з аполненную порош ком мела, и промы в ании петролейны м э фиром он получил несколько окраш енны х з он, что, несомненно, гов орило о наличии в э кстракте нескольких в ещ еств . В послед ств ии э то бы ло под тв ержд ено д руг им и исслед ов ателя ми. Э тотметод он наз в алх рома т огра ф и е й (отг реч. “ хроматос”– цв ет), хотя сам же указ ал на в озможность раз д еления и бесцв етны х в ещ еств . К омпоненты анализ ируемой смеси (сорбаты ) в месте с под в ижной фаз ой перед в игаются в д оль стационарной фаз ы . Е е обы чно помещ ают в стекля нную или металлическую трубку, наз ы в аемую колонкой. В з ав исимости от силы в з аимод ейств ия с пов ерхностью сорбента (з а счет ад сорбции или по каком у-либо д руг ому механиз м у) компоненты буд ут перемещ аться в д оль колонки с раз ной скоростью. О д ни ком поненты останутся в в ерхнем слое сорбента, д руг ие, в меньш ей степени в з аимод ейств ующ ие с сорбентом, окажутся в нижней части колонки, а некоторы е и в ов се покинут колонку в месте с под в ижной фаз ой, (такие компоненты наз ы в аются не уде рж и ва е мы ми , а в рем я их уд ержив ания опред еля ет “ мертв ое в ремя ” колонки). Т аким образ ом, происход ит бы строе раз д еление сложны х смесей компонентов . П ри перемещ ении в д ольколонки под в ижная фаз ав стречаетнасв оем пути в се нов ы е и нов ы е слои сорбента, чтообеспечив аетмног ократностьактов сорбции-д есорбции раз д еля емы х компонентов . Э тим обуслов лена з начительно больш ая
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 2
- 3
- 4
- 5
- 6
- …
- следующая ›
- последняя »