Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 142 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

141
В 1980 г. Карло М. Кроче с сотрудниками (США) удалось создать ста-
бильную, продуцирующую антигены, внутривидовую человеческую гиб-
ридому путем слияния В-лимфоцитов миеломного больного с перифери-
ческими лимфоцитами от больного с подострым панэнцефалитом.
Основные этапы получения гибридомной техники следующие. Мышей
иммунизируют антигеном, после этого из селезенки выделяют спленоци-
ты, которые в
присутствии полиэтиленгликоля сливают с дефектными
опухолевыми клетками (обычно дефектными по ферментам запасного
пути биосинтеза нуклеотидовгипоксантина или тиамина). Далее на се-
лективной среде, позволяющей размножаться только гибридным клеткам,
проводят их отбор. Питательную среду с растущими гибридомами тести-
Антиген
Антиген
А
нтитело
Анти-
сыворотка
Смесь
антите
л
Моноклональные антитела
Антигенная
детерминанта
Селезенка
Слияние
Лимфоциты
Лимфоциты
Миеломные
клетки
Гибридные
миеломные
клетки
А
Б
Клон 1 Клон 2
Клон 3 Клон 4
Рис. 4.5. Схема продукции моноклональных антител гибридомой,
образованной лимфоцитами и миеломными клетками (по Г. Фаффу, 1984).
Аантиген с 4 антигенными детерминантами на поверхности; после инъекции антигена лимфоциты мыши
продуцируют 4 типа антител; антисыворотка из крови мыши содержит смесь антител; Блимфоциты
сливаются с миеломными клетками; гибридные клетки (источник чистых антител) клонируют.