Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 194 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

193
Технология получения сухого препарата азотобактерина аналогична
получению сухого нитрагина и включает получение посевного материала
и культивирование бактерий в контролируемых условиях в глубинной
стерильной культуре до начала стационарной фазы. Готовый препарат с
содержанием не менее 5 млрд. жизнеспособных клеток на 1 кг при оста-
точной влажности 5–7 % фасуют в полиэтиленовые мешки 0.4–2.0 кг, ко-
торые герметизируют
и далее хранят при температуре до 15°С. Промыш-
ленностью выпускаются также торфяной и почвенный препараты азото-
бактерина. Для этого в качестве наполнителя используют разлагающийся
торф с нейтральной реакцией среды или богатую перегноем почву. В про-
сеянную почву или торф вносят суперфосфат (0.1 %) и известь (1–2 %).
Смесь фасуют в бутылки объемом 0.5 л, увлажняют
водой до 40–60 % и
стерилизуют. В стерильный наполнитель вносят выросшую культуру бак-
терий. Длительность хранения препаратов – 2–3 месяцев. При обработке
семян препарат вносят из расчета 3–6 кг на 1 га пашни.
Способ применения азотобактерина определяется посевным материа-
лом: семена зерновых культур опудривают сухим препаратом механизи-
рованным способом; клубни картофеля и корневую систему рассады
овощных культур
равномерно обрабатывают водной суспензией препара-
та.
В последние годы для изучения биологической азотфиксации стали
применять методы молекулярной биологии и новейшие методы генетики.
Установлена возможность с помощью колифага P
1
размножать свободно-
живущую азотфиксирующую бактерию Klebsiella pneumoniae М5 и с ее
помощью трансдуцировать nif-гены (гены азотфиксации). Также доказано,
что перенос nif-генов возможен с помощью плазмид от штамма-
азотфиксатора к штамму, не обладающему диазотрофностью. Обнаруже-
ны конъюгативные плазмиды, несущие гены азотфиксации, относительно
легко передающиеся при конъюгации от штамма к штамму. После этого
появились
надежды на получение методами клеточной и генной инженерии
растений, способных фиксировать атмосферный азот. Однако перенос генов
азотфиксации и их экспрессия является чрезвычайно сложной задачей.
Активные исследования в этом направлении, начатые в середине 70-х
годов, пока не принесли желаемых плодов. После установления в начале
90-х гг. структуры и организации nif-генов усилия
исследователей были
сосредоточены на изучении функционирования этих генов и природы их
продуктов. Вслед за открытием крупных плазмид в ряде азотфиксирую-
щих микроорганизмов было установлено, что эти плазмиды содержат не
только структурные гены нитрогеназы, но и гены, ответственные за разви-
тие корневых клубеньков в определенных видах бобовых растений. Био-
химические характеристики нитрогеназы
разных азотфиксаторов сходны.
Это свидетельствует о гомологичности генов, кодирующих их синтез. Го-
мология структуры ДНК явилась предпосылкой для клонирования nif-

Страницы