Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 22 стр.

     Методы количественного учета почвенных водорослей. Для прямого
учета микроскопических водорослей среди почвенных частиц чаще всего
используют метод Виноградского в модификации Э.А.Штиной (Зенова,
Штина,1990),    состоящий в следующем. Навеску почвы (1 г) растирают в
ступке резиновым наконечником с небольшим количеством воды. Если свежая
почва была фиксирована формалином для сохранения в ней водорослей при
последующем подсчете клеток, то почву растирают в формалине. Добавляют
воду, доводя объем суспензии до 4 мл, и тщательно взбалтывают 2 мин. После
30 сек отстаивания надосадочную жидкость сливают. Процедуру повторяют
три раза. Затем надосадочную жидкость центрифугируют (500 g/мин 1 мин).
Каплю суспензии наносят на предметное стекло, закрывают покровным
(препарат "раздавленная капля") и микроскопируют в оптическом микроскопе.
Просчитывают водоросли не во всей капле, а только в части ее, просматривая,
например, каждую вторую или пятую полосы, равные по ширине диаметру
поля зрения. При учете клеток в оптическом микроскопе разделяют водоросли
по систематическим группа, отмечая число синезеленых (цианобактерий);
зеленых и желтозеленых (вместе), диатоиовых. При наличии многоклеточных
форм отмечают число особей и число клеток.
     При    люминесцентном       методе         учета    клеток   водорослей   для
приготовления    препаратов     (Кожевин,        1989)     почвенную    суспензию
обрабатывают на ультразвуковом дезинтеграторе (2 кГц, 44А, 2 мин), наносят
на обезжиренное предметное стекло (0,01 мл на препарат) и равномерно
распределяют по площади квадрата 4 см2. На каждом стекле делают по 3
препарата. Препараты высушивают на воздухе при комнатной температуре,
фиксируют легким нагреванием и микроскопируют в люминесцентном
микроскопе. Число водорослей в 1 г почвы рассчитывают по формуле:
                                        anS
                                   N
                                          p

где a – среднее число клеток в поле зрения; p – площадь поля зрения (мкм2); n –
показатель разведения; S – площадь мазка.

                                        21