Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 97 стр.

Одновременно     анализируют    две   группы     по    5   особей.   Животных
обездвиживают в кипятке в течение 1-2 с и вскрывают в стерильных условиях.
     При аккуратном вскрытии стерильными инструментами поверхностная
стерилизация животного не обязательна, так как возможно избежать
соприкосновения кишечника с внешней стороной тела. Животного перед
вскрытием можно обработать гипохлоритом натрия или спиртом Мелких
животных (энхитреид, коллембол) отмывают при вращении сосуда с кипяченой
водой, затем в стерильной воде со стрептомицином (1:10). Последний смыв
высевают для контроля стерильности на МПА, КАА, сусло-агар.
      Поверхность панцирных клещей стерилизуют свежеприготовленной
хлорноватистой   кислотой.     Орибатиды   для   изучения     микроорганизмов
кишечника заливают в парафиновый блок, срезы приготовляют стерильным
скальпелем.
      Животных вскрывают стерильным скальпелем, отделяют и извлекают
кишечники. При малых размерах животных не выделяют их кишечники. В
этом случае из тел беспозвоночных с отмытой и простерилизованной
поверхностью тела приготовляют гомогенат, который затем высевают на среду.
     Кишечник разделяют на отделы – передний, средний и задний, каждый из
которых стерильно вскрывается при помощи иглы под контролем в
бинокулярной лупе. Из кишечника достают содержимое и помещают на
влажную стерильную фильтровальную бумагу. Содержимое кишечников 5 –ти
особей   взвешивают   (параллельно    определяют      влажность   содержимого,
высушивая его при 1050), добавляют 2 капли стерильной воды и растирают в
ступке пестиком с резиновым наконечником. Объем гомогената доводят до 3 мл
стерильной водой. Посев производят либо без разведения, либо из разведений
1:10, 1:100 микродозатором по 50 мкм на чашку в 5-10 повторностях.
     Для анализа микроорганизмов, адсорбированных на кишечном эпителии,
используют "голодных" особей. Животных отсаживают с опада на несколько
суток на влажную фильровальную бумагу для освобождения кишечника от
содержимого. Кишечник стерильно изолируют и разделяют на отделы, не

                                      96