Микробиология с основами вирусологии. Алёхина Г.П. - 14 стр.

                                   Способ Грама.
      1.       Окрасить подготовленный фиксированный препарат генциан-
               виолетом (положить на препарат бумажку синева цвета и смо-
               чить ее водой 1-2 минуты).
      2.       Протравить препарат раствором Люголя –1 минуту.
      3.       Обработать препарат спиртом – 30 секунд.
      4.       Смыть спирт водой.
      5.       Окрасить препарат водным фуксином – 1-2 минуты.
      6.       Смыть фуксин водой.
      7.       Просушить препарат фильтровальной бумагой или на воздухе.
                           Механизм окраски по Граму.
      Способ окраски разработанный Кристианом Грамом в 1884 году, является
самым универсальным из сложных способов окраски. Все бактерии по своему
отношению к этому методу распределяются на две группы: грамположитель-
ные (фиолетового цвета) и грамотрицательные (красного цвета). Отношение к
окраске по Граму является настолько важным опознавательным признаком бак-
терий, что обязательно упоминается в их характеристике.
      Механизм окраски по Граму основан на способности некоторых грампо-
ложительных бактерий связывать кристаллический фиолетовый и после обра-
ботки йодом и промывания этиловым спиртом сохранять образующийся ком-
плекс краситель-йод. Этот комплекс фиксируется на магниевых солях РНК, ко-
торые содержатся в цитоплазме грамположительных бактерий, у грамотрица-
тельных бактерий магниевые соли РНК имеются в небольшом количестве. От-
мечается разница в проницаемости клеточных стенок у этих двух групп бакте-
рий.
      Грамотрицательные бактерии содержат в клеточной стенке значительно
меньше гликопептида (рис.2), молекула которого «сшита» гораздо слабее, чем
это имеет место в клеточной стенке грамположительных бактерий.

      Предложенная смесь бактерий, обладает различными тинкториальными
свойствами. Сделайте прапарат и окрасьте его по методу Грама. Затем исклю-
чите из окраски последовательно йод или спирт. Дайте объяснение механизма
окраски по Граму, а также сделайте вывод о назначении каждого компонента.

Таблица 3 Протокол исследования.

Исследуемый   Ингредиенты     Назначение             Результаты (рисунки)
  материал     окраски по    основных ин-
              Граму и вре-    гредиентов    Окраски по   Окраска по     Окраска по
              мя их дейст-                    Граму      Граму без      Граму без
                  вия                                     спирта         Люголя




14