Биофизика. Артюхов В.Г - 8 стр.

                                      8

      Важнейшим следствием из закона Бугера-Ламберта-Бера является
следующее положение: оптическая плотность прямо пропорциональна
концентрации данного вещества:
                                      D = εсl. (4)
      Спектр поглощения –это график зависимости оптической плотности (или
коэффициента экстинкции) от длины волны. При этом по оси ординат
откладывают D (или ε), а по оси абсцисс – длину волны измерения (λ, нм).
      λmax - длина волны, при которой на кривой светопоглощения опытного
образца появляется пик. Спектр поглощения может иметь несколько максимумов
поглощения.
      Полуширина полосы поглощения равна расстоянию между двумя точками
полосы, находящимися на высоте, равной половине максимальной. Она
измеряется в нм.
      Таким образом, при интерпретации спектров поглощения необходимо
указывать положение полос поглощения, их интенсивность и полуширину.
      Поглощение света осуществляется не всей молекулой, а определенными ее
участками. Хромофоры - это отдельные группы атомов в молекуле вещества,
поглощающие кванты света в УФ- и видимой областях спектра. Основными
хромофорами в белках являются пептидные группы, ароматические
аминокислоты (тирозин, триптофан, фенилаланин) и цистин. Указанные
хромофоры поглощают в УФ-области спектра. В нуклеиновых кислотах
хромофоры - пуриновые и пиримидиновые азотистые основания (аденин, гуанин,
тимин, цитозин и урацил).
      Хромофорами сложных белков, в частности гемопротеидов, в видимой
области являются гемы. Так, благодаря железопорфирину в составе гембелка,
раствор оксигемоглобина обнаруживает несколько максимумов поглощения в
этой области спектра: самый интенсивный в области 412-414 нм (полоса Соре) и
максимумы меньшей интенсивности при 542 и 578 нм.
      Однокомпонентные неокрашенные белки (сывороточный и яичный
альбумины, трипсин, пепсин, глобулины и др.) не поглощают свет с длинами волн
400-700 нм.
      Поглощение видимого и УФ-света происходит главным образом с участием
π- и n-электронов (π-π* - и n-π* -переходы). Чем длиннее система сопряженных
связей в молекуле, тем при большей длине волны располагается длинноволновой
максимум поглощения.
      Спектры поглощения применяются для качественного (установления
структуры, подлинности, чистоты) и количественного (выбор аналитических длин
волн) анализа лекарственных средств.
      Идентификацию (установление подлинности) лекарственных веществ в
субстанции или однокомпонентных лекарственных формах осуществляют:
              - путем сравнения спектров поглощения испытуемого и
        стандартного (ГСО) образцов, полученных в одних и тех же условиях
        (АТФ, рибоксин и др.)
              - по известным параметрам спектров поглощения: