Основы экологического мониторинга. Белюченко И.С - 168 стр.

     3.7 Колориметрическое определение пигментов
         в растительном материале

      Одним из наиболее точных и быстрых способов количественной
оценки пигментов является определение их концентрации на фото-
электроколориметре, который позволяет без калибровочных кривых
на основании экспериментально полученных данных по оптической
плотности известных для каждого пигмента величин молярного или
удельного коэффициента поглощения при определённой длине волны
рассчитать концентрацию пигментов.
      Содержание хлорофиллов a и b и каротиноидов можно опреде-
лить в исходной вытяжке пигментов без предварительного их разделе-
ния. Для этого измеряют оптическую плотность экстракта на фото-
электроколориметре при двух длинах волн, соответствующих макси-
мумам поглощения хлорофиллов а и b в красной области спектра при
длине волны адсорбционного максимума каротиноидов. Предвари-
тельно необходимо установить положение максимумов и разбавить
экстракт до такой степени, чтобы получить величину оптической
плотности (D) в пределах от 0,1 до 0,8 при λmax 665.
     Цель работы – провести сравнительное определение содержа-
ния пигментов в листьях различных растений.
     Оборудование, материалы и реактивы:
     – фотоэлектроколориметр;
     – центрифуга;
     – торсионные весы;
     – фарфоровая ступка с пестиком;
     – пробирки на 10 мл с притертой пробкой;
     – спирт 96%.
      Ход работы
      1. Приготовление вытяжки пигментов. Для этого листья одного
яруса необходимо измельчить, отбросить черешки и крупные жилки.
Взвесить 40 мг материала и перенести в пробирки. Добавить 10 мл
96% спирта. Поместить пробирки с содержимым в темное место на
двое суток до полного выхода пигментов из навески в раствор.
      2. Оптическую плотность экстракта определяют на фотоэлек-
троколориметре при следующих длинах волн (нм):

                               168