Биология и микробиология. Березовская В.А - 58 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

КамчатГТУ | Петропавловск-Камчатский

Составители: 

Рубрика: 

58
4.2.2.1. На сухой мазок наносят 1–2 капли 0,5%-ного рас-
твора соляной кислоты и нагревают его в течение 1–2 мин над
пламенем спиртовки (до выделения паров).
4.2.2.2. Остатки кислоты сливают, мазок промывают водой,
высушивают на воздухе и фиксируют в пламени спиртовки (как
указано в п. 4.1).
4.2.2.3. На охлажденный фиксированный мазок наносят
1–2 капли фуксина Циля и нагревают над пламенем спиртовки
до появления пара. При этом необходимо следить, чтобы рас-
твор краски не подсох.
4.2.2.4. Краситель смывают водой и погружают препарат в
стаканчик с 5%-ным раствором серной кислоты на 20–40 с, по-
сле чего его сразу же промывают водой. При погружении в ки-
слоту протоплазма клеток обесцвечивается, а споры остаются
окрашенными.
4.2.2.5. На промытый препарат наносят на 3–5 мин мети-
леновую синь Лефлера (2–3 капли), после чего препарат тща-
тельно промывают водой и высушивают.
При этом способе окраски споры окрашиваются в красный
цвет, а клетки – в голубой.
4.3. Окрасить бактерии по методу Грама.
Сущность метода заключается в том, что бактерии после-
довательно окрашиваются красителем генцианвиолетом и йо-
дом, а затем обрабатываются спиртом. При этом одни бактерии
– грамположительные – остаются окрашенными, а другие –
грамотрицательные – обесцвечиваются. Это связано с тем, что
у грамположительных бактерий образовавшееся окрашенное
соединение при обработке спиртом удерживается в протоплаз-
ме клетки, а у грамотрицательных оно вымывается из клетки.
Приготовить мазок так, как указано в п. 4.1.
4.3.1. На фиксированный мазок кладут полоску фильтро-
вальной бумаги, наносят на нее в том месте, под которым нахо-
дится мазок, 3–4 капли раствора генцианвиолета, и при помо-
щи пинцета разглаживая бумагу, плотно прижимают к стеклу.
Через 2 мин бумагу снимают, а излишки краски смывают водой.
4.3.2. На мазок наносят 3–4 капли раствора Люголя (рас-
твор йода в йодистом калии) и по истечении 2 мин сливают его. 
    4.2.2.1. На сухой мазок наносят 1–2 капли 0,5%-ного рас-
твора соляной кислоты и нагревают его в течение 1–2 мин над
пламенем спиртовки (до выделения паров).
     4.2.2.2. Остатки кислоты сливают, мазок промывают водой,
высушивают на воздухе и фиксируют в пламени спиртовки (как
указано в п. 4.1).
     4.2.2.3. На охлажденный фиксированный мазок наносят
1–2 капли фуксина Циля и нагревают над пламенем спиртовки
до появления пара. При этом необходимо следить, чтобы рас-
твор краски не подсох.
     4.2.2.4. Краситель смывают водой и погружают препарат в
стаканчик с 5%-ным раствором серной кислоты на 20–40 с, по-
сле чего его сразу же промывают водой. При погружении в ки-
слоту протоплазма клеток обесцвечивается, а споры остаются
окрашенными.
    4.2.2.5. На промытый препарат наносят на 3–5 мин мети-
леновую синь Лефлера (2–3 капли), после чего препарат тща-
тельно промывают водой и высушивают.
    При этом способе окраски споры окрашиваются в красный
цвет, а клетки – в голубой.
    4.3. Окрасить бактерии по методу Грама.
    Сущность метода заключается в том, что бактерии после-
довательно окрашиваются красителем генцианвиолетом и йо-
дом, а затем обрабатываются спиртом. При этом одни бактерии
– грамположительные – остаются окрашенными, а другие –
грамотрицательные – обесцвечиваются. Это связано с тем, что
у грамположительных бактерий образовавшееся окрашенное
соединение при обработке спиртом удерживается в протоплаз-
ме клетки, а у грамотрицательных оно вымывается из клетки.
    Приготовить мазок так, как указано в п. 4.1.
    4.3.1. На фиксированный мазок кладут полоску фильтро-
вальной бумаги, наносят на нее в том месте, под которым нахо-
дится мазок, 3–4 капли раствора генцианвиолета, и при помо-
щи пинцета разглаживая бумагу, плотно прижимают к стеклу.
Через 2 мин бумагу снимают, а излишки краски смывают водой.
    4.3.2. На мазок наносят 3–4 капли раствора Люголя (рас-
твор йода в йодистом калии) и по истечении 2 мин сливают его.
                             58

Страницы