Биология и микробиология. Березовская В.А - 75 стр.

UptoLike

Рубрика: 

75
4.7. Выделить чистую культуру микроорганизмов.
Существует несколько методов выделения чистой культуры
микроорганизмов. Наиболее распространенными среди них
являются выделение чистой культуры методом рассева в глу-
бине среды, а также выделение чистой культуры по методу
Дригальского и в его модификациях.
4.7.1. Выделить чистую культуру методом рассева в глуби-
не среды.
Берут 35 пробирок, в которых находится по 510 мл пита-
тельного желатина или мясо-пептонного агара и расплавляют
их содержимое на водяной бане. Пробирки с расплавленной
средой охлаждают до 4345 °С и ставят в теплую воду, чтобы
предупредить застудневание среды. В одну из пробирок сте-
рильной пипеткой или петлей вносят исследуемый материал.
Затем другой стерильной пипеткой или петлей часть содержи-
мого первой пробирки переносят во вторую, из второй в тре-
тью и т. д. Засеянные пробирки со средой хорошо перемеши-
вают, зажав их между ладонями (вращают несколько раз то в
одну, то в другую сторону). Приготовленные таким образом
разведения бактерии выливают из пробирок в чашки Петри,
обозначенные номерами, соответствующими номерам пробирок.
После загустевания среды чашки помещают в термостат и
термостатируют 24 часа при температуре 37 °С. Количество
выросших в чашках Петри колоний уменьшается по мере уве-
личения разведения взятого на посев материала.
4.7.2. Выделение чистой культуры по методу Дригальского.
Расплавленную питательную среду разливают в 3 чашки
Петри с толщиной слоя не менее 0,5 см. Застывшую среду обя-
зательно подсушивают. В первую чашку петлей вносят не-
большое количество исследуемого материала и шпателем Дри-
гальского или шпателем, сделанным из пастеровской пипетки,
втирают его в поверхность питательной среды. Затем шпатель
(не обжигая и не набирая нового материала) переносят сначала
во вторую чашку, а затем в третью. В каждой из них оставшийся
на шпателе материал втирают в поверхность питательного агара.
Вместо шпателя можно использовать бактериальную пет-
лю. Для этого ее с небольшим количеством микроорганизмов
    4.7. Выделить чистую культуру микроорганизмов.
    Существует несколько методов выделения чистой культуры
микроорганизмов. Наиболее распространенными среди них
являются выделение чистой культуры методом рассева в глу-
бине среды, а также выделение чистой культуры по методу
Дригальского и в его модификациях.
    4.7.1. Выделить чистую культуру методом рассева в глуби-
не среды.
    Берут 3–5 пробирок, в которых находится по 5–10 мл пита-
тельного желатина или мясо-пептонного агара и расплавляют
их содержимое на водяной бане. Пробирки с расплавленной
средой охлаждают до 43–45 °С и ставят в теплую воду, чтобы
предупредить застудневание среды. В одну из пробирок сте-
рильной пипеткой или петлей вносят исследуемый материал.
Затем другой стерильной пипеткой или петлей часть содержи-
мого первой пробирки переносят во вторую, из второй – в тре-
тью и т. д. Засеянные пробирки со средой хорошо перемеши-
вают, зажав их между ладонями (вращают несколько раз то в
одну, то в другую сторону). Приготовленные таким образом
разведения бактерии выливают из пробирок в чашки Петри,
обозначенные номерами, соответствующими номерам пробирок.
    После загустевания среды чашки помещают в термостат и
термостатируют 24 часа при температуре 37 °С. Количество
выросших в чашках Петри колоний уменьшается по мере уве-
личения разведения взятого на посев материала.
    4.7.2. Выделение чистой культуры по методу Дригальского.
    Расплавленную питательную среду разливают в 3 чашки
Петри с толщиной слоя не менее 0,5 см. Застывшую среду обя-
зательно подсушивают. В первую чашку петлей вносят не-
большое количество исследуемого материала и шпателем Дри-
гальского или шпателем, сделанным из пастеровской пипетки,
втирают его в поверхность питательной среды. Затем шпатель
(не обжигая и не набирая нового материала) переносят сначала
во вторую чашку, а затем в третью. В каждой из них оставшийся
на шпателе материал втирают в поверхность питательного агара.
    Вместо шпателя можно использовать бактериальную пет-
лю. Для этого ее с небольшим количеством микроорганизмов
                             75