Роль микроорганизмов в очистке сточных вод от тяжёлых металлов. Буракаева А.Д - 48 стр.

да, которые состоят из окисла железа, а маленькие бобовидные клетки распо-
лагаются на разветвленных кончиках пропитанных гидроокисью железа сте-
бельков.
       Цель работы – наблюдение за процессом микробиологического окис-
ления двухвалентного железа в трехвалентное и количественная оценка этого
процесса.
       На выполнение задачи требуется 16 – 18 часов.
       Занятие 1. Приготовление и стерилизация сред и посуды.
       Занятие 2. Посев культуры, микроскопирование,приготовление реакти-
вов для построения стандартной кривой.
       Занятие 3. Определение содержания Fe (III), числа клеток в культу-
ральной жидкости, оформление результатов.
       Посуда, реактивы: пипетки стерильные – 10,пробирки – 25 штук, сер-
ная кислота (концентрироанная), железо-аммиачные квасцы, амми-
ак,сульфосалициловая кислота.
       Микроорганизмы и их культивирование:
       Используют культуры Leptothrix sp. и Th. ferrooxidans (окисляющий
как соединения железа, так и соединения серы).
       Leptothrix sp. Выращивают в среде следующего состава(г/л): пептон –
4,0; глюкоза – 3,0; MgSO4 – 0,1; CaCl2 – 0,05; MnSO4 –0,01; FeCl3 – 0,001; тиа-
мин – 0,2 мг; биотин – 0,02 мг;( NH4 )2 Fe – лимоннокислый (закисная соль) –
0,25; вода водопроводная – до 1 литра. РН среды до стерилизации устанавли-
вают с помощью 10% растворов NaOH N 2SO4.
       Th. ferrooxidans культивируют на среде следующего состава (г/л):
       Раствор 1- сернокислый аммоний –3,0; фосфорнокислый аммоний од-
нозамещенный – 0,5; хлористый калий – 0,1; сернокислый магний – 0,5; азот-
нокислый кальций – 0,01; вода дистиллированная – до 700 мл.
       Раствор 2 – железо сернокислое – 44,2; 1 мл 10 н. серной кислоты; вода
дистиллированная – до 300 мл.
       Растворы 1 и 2 стерилизуют отдельно при 152 кПа 30 мин. Перед засе-
вом растворы сливают, стерильно доводят рН до 2,5 при помощи 10%-ной
серной кислоты. Среду разливают по 100 мл в стерильные качалочные кол-
бы.
       В качестве посевного служат культуры в конце экспоненциальной фазы
роста (3 суточные). Их вносят в количестве 10% по объему).
       Выращивание культур ведут на качалках при температуре 30о С в тече-
ние недели. Ежедневно отбирают пробы для микроскопирования клеток и
определения количества окисного железа.
       Анализы:
       1      Микроскопирование. Для наблюдения за образованием желези-
стых чехлов Leptothrix готовят фиксированный препарат клеток, погружают
его на 3 – 5 мин. в 5%-ный раствор желтой кровяной соли, затем без промы-
вания -–0,1М раствор HCl. Осадок трехвалентного железа синеет, что,видно
при микроскопировании препарата.



48