Основы биотехнологии: культивирование изолированных клеток и тканей растений. Учебно-методическое пособие. Часть 2. Цыренов В.Ж. - 23 стр.

      Поэтому необходимо соблюдать высокую степень чистоты на           Определение мицелия или других взвешенных частиц может
всех стадиях и операциях – поддерживать в исключительной чис-     также происходить в сепараторах. При скорости вращения бараба-
тоте не только используемое оборудование, но и помещение, где     на, равной 7000-7500 об/мин, благодаря центробежной силе, твер-
осуществляется как биосинтез БАВ и так получение препарата из     дые частицы устремляются к стенкам барабана, где и осаждаются,
него с соблюдением правил международной системы ЩМР.              а отсепарированная жидкость стремиться к центру барабана и под-
                                                                  нимается в специальные камеры.
     4.3.1 Предварительная обработка биомассы.                          Выделение БАВ из клеток организма – продуцента осущест-
     Культура представляет собой суспензию клеток продуцента в    вляют с помощью экстракции органическими растворителями.
культуральной среде. При этом целевой продукт может оказаться     Есть БАВ содержится в культуральной жидкости и в клетках про-
либо в составе клеточной биомассы, либо в культуральной среде     дуцента, первичной операцией его выделения является перевод в
(нативный раствор). Ясно, что в любом из этих случаев необходи-   фазу, из которой наиболее целесообразно его изолировать. Для
мо разделить клеточную массу и культуральную среду, что по сути   этого БАВ, содержащиеся в культуральной жидкости и в клетках
является первым этапом очистки целевого продукта или на прак-     продуцента, переводят в осадок, а затем его экстрагируют.
тике называется этапом предварительной обработки биомассы.              При суспензионном культивировании, если БАВ находится в
     В зависимости от того, где БАВ сосредоточено (в культу-      культуральной жидкости, его выделяют методами экстракции рас-
ральной среде или в клетке) применяют соответствующие методы      творителями, которые не смешиваются с жидкой фазой, или осаж-
его извлечения. Отделение нативного раствора от биомассы взве-    дают в виде нерастворимого соединений, или сорбируют ионооб-
шенных частиц проводят методами фильтрации или центрифуги-        менными силами.
рования.                                                                При твердофазном способе культивирования с использовани-
     Для процесса фильтрации применяют различные фильтрую-        ем механизированных установок или качалок осуществляют съем
щие аппараты: фильтр-пресс, нути-, друк-фильтры, центрифуги,      сырой биомассы хорошо выросшей культуры, затем проводят
сепараторы.                                                       сушку биомассы на противнях при температуре 58 ± 2°С. Время
     Фильтр-прессы применяют для обработки больших объемов        сушки биомассы зависит от:
культуральной жидкости. Эти аппараты состоят из ряда чередую-         - начальной влажности биомассы;
щихся плит и рам и фильтрующих перегородок между ними. Про-           - толщины слоя биомассы;
цесс фильтрации осуществляется под давлением.                         - температуры сушки.
     Для фильтрации небольших объемов культуральной жидко-              Окончание процесса сушки определяют на ощупь. Не должно
сти обычно используют нути-, друк-фильтры. Первый аппарат ра-     быть мягких влажных комочков. Сухая масса должна быть от жел-
ботает под вакуумом, второй – в условиях повышенного давления     того до коричневого цвета, рыхлая, легко рассыпающаяся при про-
над фильтрующейся жидкостью.                                      давливании между пальцами. Остаточная влажность биомассы по-
     Для получения жидкости, освобожденной от взвешенных          сле сушки не более 12%. Затем сухую биомассу подают на стадию
частиц, широкой распространение нашел метод центрифугирова-       выделения и очистки БАВ с аналитическим паспортом на содер-
ния.                                                              жание БАВ.


                                                        47             48