Основы экотоксикологиии. Гомбоева С.В - 17 стр.

проводят учет результатов и при наличии зон задерж-
ки роста тест-культуры измеряют их диаметр, включая                      Лабораторная работа № 4
диаметр диска.                                                        Определение токсичности почвы
     В одну чашку одновременно можно помещать 4—5
дисков с испытуемыми экстрактами культур, а для контро-          Почва является не только аккумулятором полезных,
ля в центр чашки кладут диск, смоченный используемым       но токсичных элементов, которые подавляют процессы са-
растворителем.                                             моочищение почвы (биологические, физико-химические и
     II вариант. Определение токсичности грибов с помо-    др.), а также потенциально могут влиять на различные зве-
щью агаровых блоков используют для установления ток-       нья трофической цепи.
сичности колоний грибов, выросших в первичных посевах            Цель работы: Исследование почвы на токсичность
кормов.                                                    микробиологическим методом.
     Агаровые блоки готовят с помощью трубчатого свер-           Реактивы, посуда, приборы: культуры микроорга-
ла из газона 5-дневных колоний грибов в чашках Петри.      низмов (E.Coli, Bas. Subtillis, дрожжи, грамположительные
Блоки накладывают мицелием на высохшую поверхность         бактерии). Среды МПА, Эшби. Чашки Петри, шпатели,
питательной среды с тест-культурой (см. п. 3.) и дальше    целлофан, пробирки, пипетки на 1 и 10 мл, микропипет-
поступают, как и с дисками (см. I вариант).                ки на 0,1 мл, трубчатое сверло 8 мм, термостат, холо-
     Для стимуляции токсинообразования грибов рода         дильник, диски из фильтровальной бумаги 8 мм.
Fusarium чашки с выросшими культурами перед исследо-             Подбор тест-культур и выбор и приготовление пита-
ванием помещают на 2 дня в холодильник при 4—6°С. В        тельных сред студенты самостоятельно выполняют к на-
дальнейшем с ними поступают, как указано выше.             чалу лабораторного занятия.
     Оценка токсичности. Оценку токсичности грибов               Ход работы. Свежеприготовленную агаровую среду
проводят на основании величины зон подавления роста        разливают в стерильные чашки Петри и после застывания
тест-организма, вокруг дисков или блоков:                  среды покрывают стерильными пленками целлофана, ко-
                                                           торые тщательно расправляют на поверхности агара ме-
    Степень токсичности     Диаметр зон подавления роста   таллическим шпателем. Целлофан предварительно выре-
                                  тест-культуры, мм        зают кружками с диметром, равным диаметру чашки Пет-
        Токсичные           16 мм и более                  ри, смачивают водой и в таком состоянии стерилизуют в
      Слаботоксичные        9—15 мм                        автоклаве. На поверхность целлофана в центр чашки Петри
       Нетоксичные          отсутствие зоны задержки       с агаром накладывают комочек испытуемой почвы диамет-
                                                           ром 3 см, также увлажненной водой. Можно расположить
     Обнаружение токсинообразующих грибов позволяет        не один, а 4 комочка на равном расстоянии друг от друга,
установить причину токсичности корма и решить вопрос       тогда диаметр будет несколько меньше, около 1 см. После
об его использовании и обезвреживании в соответствии с     наложения комочков почвы на целлофан чашки выдержи-
санитарно-микологической оценкой и улучшением качест-      вают в термостате в течение суток. Через сутки целлофан с
ва кормов.

                                                      33   34