ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
4
зов и дегенерирующих клеток. Наступает равновесие между ослабленным
процессом размножения и усиленной гибелью асцитных клеток. Иногда
отмирание клеток преобладает и отмечается снижение общего числа взве-
шенных в жидкости опухолевых клеток. Несмотря на прекращение при-
роста числа клеток, асцитическая жидкость продолжает накапливаться,
вызывая тем самым заметное снижение концентрации опухолевых клеток.
Диаметр клеток асцитной опухоли Эрлиха в среднем составляет 30-40
мкм. Наружная мембрана асцитных клеток морфологически мало отлича-
ется от мембран большинства клеток животного происхождения (Гвичия,
1983). В клетках асцитной аденокарциномы Эрлиха находятся все цито-
хромы и нормально функционирует цикл Кребса (Шапот, 1975). Раковые
клетки обладают мощной гликолитической активностью и умеренным по
интенсивности дыханием.
Асцитные клетки карциномы Эрлиха, практически лишенные способ-
ности синтезировать высшие жирные кислоты, получают их в готовом ви-
де от организма-хозяина через асцитную жидкость, в которую они перехо-
дят в комплексе с альбумином. Большинство поглощенных из среды рако-
выми клетками свободных жирных кислот входит в состав нейтральных
жиров или фосфолипидов. Также опухоль функционирует в организме как
ловушка азота.
АКЭ является удобной экспериментальной моделью злокачественно-
го новообразования, она часто применяется для решения различных задач
в экспериментальной онкологии.
В настоящее время, кроме асцитного, известны солидные варианты
АКЭ, культивируемые на коже мышей. Однако их кинетические характе-
ристики и способы перевивки описаны в литературе недостаточно, в связи
с чем использование их в практической работе затруднительно.
5
МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ
Оборудование и материалы
Для проведения работы требуются: центрифуга на 1500 об/мин, сте-
рильные центрифужные пробирки, стерильные шприцы на 5 и 1 мл, хирур-
гические ножницы, хирургический зажим, пинцет, пенопластовый столик
для фиксации мыши, стерильный физиологический раствор, спирт, вата,
марля, хирургические перчатки, камера Горяева, предметные стекла, кра-
ситель Романовского, капилляр Сали, исследуемый противоопухолевый
препарат.
Примечание: все манипуляции, связанные с АКЭ, необходимо вы-
полнять только в хирургических перчатках. При работе со шприцами не-
обходимо проявлять большую осторожность, не допуская случайного уко-
ла иглой, так как на острие иглы может находиться большое количество
раковых клеток! При попадании суспензии клеток АКЭ на кожу необхо-
димо немедленно ее смыть, используя мыло или другие моющие средства,
после чего обработать кожу спиртом. После окончания работы с АКЭ не-
обходимо тщательно вымыть руки.
Взятие асцитной опухоли
Опухоль берут у мыши через 9 - 10 дней после прививки. Мышь с
опухолью умерщвляют путем дислокации шейных позвонков с помощью
хирургического зажима. После прекращения конвульсий мышь помещают
на пенопластовый столик и фиксируют иголками в положении на спине.
Тщательно протирают шерсть в области брюшной полости ватным тампо-
ном, смоченным в спирте, двигая тампон по шерсти и против шерсти. Де-
лают продольный разрез кожи в области брюшной полости, кожу оттяги-
вают пинцетом и фиксируют иголками на пенопластовом столике. Сте-
рильными ножницами делают разрез брюшной мышечной стенки и в сте-
рильный шприц объемом 5 мл набирают асцитную жидкость.
