Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 17 стр.

UptoLike

Рубрика: 

17
между наблюдаемой абсорбционностью и вычисленной по значениям
коэффициентов экстинкции и концентрации компонентов:
A = A
набл.
(ε
А
С
А
+ ε
Д
С
D
) (14)
Спектрофотометрический метод дает возможность определить
константу устойчивости комплекса , которую легко вычислить, зная
абсорбционность при длине волны поглощения комплекса и показатель
поглощения [6].
n
K
D
m
K
AK
р
l
A
nC
l
A
mCl
А
K
)()(
00
εε
ε
−⋅
−⋅
=
, (15)
где
00
,
DA
CC
- исходные концентрации компонентов; ε
К
- показатель
поглощения комплекса; m,n стехиометрические коэффициенты в
уравнении образования комплекса .
Значения ε
К
можно определить, измерив абсорбционность двух
растворов с разным соотношением компонентов. На практике применяют
частные случаи определения свойств комплексов простого состава.
Для молекулярных комплексов состава 1:1 выражение (15) можно
переписать в виде:
[
]
[]
00
)(
DA
р
CADC
AD
K
⋅−
=
, (16)
где [AD] = A
λ
/ (ε
λ
l
λ
).
Скомбинировав два уравнения, получим:
0
0
111
Dр
A
СKA
lC
+=
λλλ
εε
(17)
Графическая зависимость величины обратной абсорбционности
раствора, умноженной на концентрацию компонента А и на толщину слоя,
от величины обратной концентрации компонента D выражается прямой
линией . Отрезок, отсекаемый этой прямой на оси ординат, дает величину ,
обратную показателю поглощения комплекса , а тангенс угла наклона
прямой равен
λ
ε
р
K
1
. Определив показатель поглощения, можно найти
К
р
.
Величину К
р
можно найти и по точке пересечения с осью абсцисс. В
этой точке уравнение (17) выглядит так :
                                        17
межд у наблю д аемой абсорбци онностью и вы чи сленной по значени ям
коэ ф ф и ци ентов э ксти нкци и и концентраци и компонентов:

                 ∆A = A набл. – (εА ⋅ СА + εД ⋅ СD)                          (14)

    С пектроф от ом ет рический м ет од дает возм ож ностьопределит ь
конст анту уст ой чивости ком плекса, котору ю легко вы чи сли ть, зная
абсорбци онность при д ли не волны поглощ ени я комплекса и показ атель
поглощ ени я[6].

                                            ∆А
              Kр =                                                     ,     (15)
                                         ∆A m                 ∆A n
                     l ⋅ ε K (C A0 − m        ) ⋅ (C D0 − n        )
                                       l ⋅ε K               l ⋅ εK

гд е C A0 , C D0 - и сход ны е концентраци и компонентов; ε К - показ атель
поглощ ени я комплекса; m,n – стехи ометри чески е коэ ф ф и ци енты в
у равнени и образовани якомплекса.
     Значения ε К м ож но определит ь, и змери в абсорбци онность д ву х
растворов с разны м соотнош ени ем компонентов. Н а практи ке при меняю т
частны еслу чаи опред елени ясвойств комплексов простого состава.
     Д ля молеку лярны х комплексов состава 1:1 вы ражени е (15) можно
перепи сатьв ви д е:

                               Kр =
                                                [ AD ]
                                                               ,             (16)
                                      (C   0
                                           A   − [AD ]) ⋅ C D0

гд е[AD] = Aλ / (ελ ⋅lλ).
Скомби ни ровав д ва у равнени я, полу чи м:

                             C A0 ⋅ l   1       1     1
                                 λ
                                      = λ +       λ
                                                    ⋅ 0                      (17)
                              A        ε    K р ⋅ε С D

    Граф и ческая зави си мость вели чи ны обратной абсорбци онности
раствора, у множенной на концентраци ю компонента А и на толщ и ну слоя,
от вели чи ны обратной концентраци и компонента D вы ражается прямой
ли ни ей. О трез ок, отсекаемы й э той прямой на оси орд и нат, д ает вели чи ну ,
обратну ю показателю поглощ ени я комплекса, а тангенс у гла наклона
                     1
прямой равен               . О пред ели в показатель поглощ ени я, можно найти
                  K р ⋅ε λ
К р.
     В ели чи ну К р можно найти и по точке пересечени я с осью абсци сс. В
э той точкеу равнени е(17) вы гляд и т так: