Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 15 стр.

                                           15
     Зави си мость абсорбци онности от pH раствора в общ ем ви д е
вы ражаетсяслед у ю щ и м образ ом:
                            A A ⋅ 10 − pK A + A HA ⋅ 10 − pH
                       A=                                    (10)
                                  10 −pK A + 10 −pH

       У равнени е (10) справед ли во д ля лю бой д ли ны волны и является
основны м д ляпровед ени я спектроф отометри чески х опред елени й рК А . Д ля
вы чи слени я д анной вели чи ны необход и мо знать показ атель поглощ ени я
ки слоты (основани я) при какой-ли бо д ли не волны , показатель поглощ ени я
сопряженного основани я (ки слоты ) при той же д ли не волны и
абсорбци онность раствора и звестной концентраци и с и звестны м
з начени ем рН (при той жед ли неволны ).
       В тех слу чаях, когд а од на и з ф орм преоблад ает в растворе, его
поглощ ени е от рН не зави си т (д ля разбавленны х растворов рН раствора
при ни мается равны м рН раствори теля). А бсорбци онность зави си т от рН
только в у зкой области , гд е концентраци и ф орм сравни мы д ру г с д ру гом.
Д ля и змерени я рК А спектроф отометри чески м метод ом рН          раствора
след у ет и з менятьв пред елах рК A + 2 ≥ pH ≥ pKA – 2.
       Д ля спектроф отометри ческого опред елени я pKA след у ет у чи ты вать
след у ю щ и е д опу щ ени я: реакци я и они з аци и д олжна протекать без
побочны х процессов; коэ ф ф и ци енты светопоглощ ени я кажд ой и з
ки слотно-основны х ф орм д олжны бы ть нез ави си мы от pH и раз ли чаться в
рассматри ваемой области спектра; д олжна опред еляться абсорбци онность
растворов,       сод ержащ и х   од ну     из    ки слотно-основны х    ф орм.
Спектроф отометри чески й метод является ед и нственно д осту пны м при
и сслед овани и очень слабы х основани й , сопряженны е ки слоты которы х
и мею т рК А <1 – 2, когд а потенци ометри ческое ти тровани е невоз можно
[6,7].
     Н а основании данны х спект роф от ом ет рического определения
м ож но рассчитат ь концентрацию вещест ва, которое нах одится в
раст воре в присут ст вии поглощающей прим еси с неизвест ны м и
х аракт ерист икам и.
     В э том слу чаеабсорбци онностьвы ражаетсяслед у ю щ и м образом:

                            A = C⋅ε⋅l +Aпри меси                          (11)

     П ред полагается, что ход зави си мости ε от д ли ны волны (λ) и звестен.
Н аи более распространен слу чай, когд а спектральны й ход поглощ ени я
при меси можно и з образи тьпрямой ли ни ей :

                           А при меси = а + в⋅λ                           (12)