Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 13 стр.

                                            13
вс т упаю щи х в хи м и чес кое взаи м одейс т ви е др уг с др угом , р авн а с ум м е
абс ор бци о н н ос т ей каж дого и з с оеди н ен и й):
                                                                   m

                  А = ε 1⋅ с 1 ⋅ l + ε 2⋅ с 2 ⋅ l + εm⋅ с m⋅ l = l ∑ ε i ⋅ c i      (5)
                                                                  i =1


        Д ли ны волн, при которы х след у ет провод и ть и змерени я опти ческой
плотности , след у ет вы би рать по спектрам поглощ ени я анали зи ру емы х
вещ еств, при меняя разли чны е при емы , напри мер, метод макси мальны х
разностей. Сначала сни маю т спектры поглощ ени я опред еляемы х
компонентов, з атем строят граф и к зави си мости разни цы коэ ф ф и ци ентов
светопоглощ ени я от д ли ны волны и наход ят области макси му ма и
ми ни му ма. Д ли ны волн, соответству ю щ и е э ти м областям, вы би раю т как
анали ти чески е. Ч асто э ти области совпад аю т с областью макси мального
поглощ ени я кажд ого и з компонентов. М олярны е коэ ф ф и ци енты
поглощ ени я опред еляю тся заранее, поэ тому анали з свод и тся к
опред елени ю абсорбци онности при д ву х вы бранны х д ли нах волн.
        О собы й и нтереспред ставляю т спектральны е у частки , в которы х од но
и з органи чески х вещ еств не поглощ ает свет, а д ру гое облад ает
и нтенси вны м светопоглощ ени ем. П ри нали чи и такой области повы ш ается
точностьопред елени яи нтенси вно поглощ аю щ его свет вещ ества.
        Е сли д ля од ного компонента закон Бу гера-Л амберта-Бера не
вы полняется, то у равнени е Ф и рорд та (5) справед ли во д ля смеси с
постоянной концентраци ей э того э лемента. П роверка при нци па
ад д и ти вности абсорбци онности может бы ть провед ена сравнени ем
найд енны х абсорбци онностей д ля ряд а смесей и звестного состава со
з начени ями абсорбци онностей, вы чи сленны ми по у равнени ю Ф и рорд та.
        П рави льность спектроф отометри чески х д анны х можно оцени ть по
резу льтатам и сслед овани я станд артов. Э талоном абсорбци онности за
ру бежом являетсяраствор 0,06 г/л K2Cr2 O7 в 0,005 М H2SO4 (область 235-
350 нм). След у ет у чи ты вать погреш ности отсчета по ш кале д ли н волн,
которы е составляю т д о 0,7 % и кю ветны е погреш ности – 0,05-0,2 %.
Рабочи й и нтервал абсорбци онностей растворов составляет 0,2 – 1,5.
В ели чи на пред ела обнару жени я з ави си т от погреш ности ф она и
опред еляется анали ти чески м си гналом, превы ш ени е которого не д олжно
слу жи тьмерой ф акти ческой концентраци и вещ ества в растворе.
        С пект р офо т ом ет р и чески м        м ет одом      м ож н о      опр еделят ь
                                           -4        -6
кон цен т р аци и в и н т ер вале 10 – 10 м оль/л, т ак как м оляр н ы е
коэф фи ци ен т ы поглощен и я обы чн о леж ат в и н т ер вале 103 - 4⋅103
л/м оль⋅с м . М акси м альн ы ем оляр н ы екоэф фи ци ен т ы с вет о поглощен и ядля
о р ган и чес ки х со еди н ен и й с ос т авляю т      1,5⋅105 л/м оль⋅с м . По казат ель
поглощен и яε опр еделяет с яс т очн ос т ью 1-5 % [6].
      С пектроф от ом ет рический             м етод       позволяет        исследоват ь
протолитические реакции и определят ь рК кислот ы (конст ант у
ионизации кислот ы ).