Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 45 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

45
4,8
5,0
5,2
5,4
5,6
5,8
020406080100120
τ
,
час
ε⋅10
−3
,
л/моль
⋅
см
Рис.18.
Зависимость
молярного
коэффициента
светопоглощения
от времени
выдерживания
раствора
триптофана с
концентрацией
0,12·10
3
моль/ дм
3
,
рН=5,77,
λ = 279 нм .
6.4. Определение гистидина
Для спектра поглощения гистидина (рис.19) характерно наличие двух
максимумов поглощения при 190 и 210 нм . Аналитической длине волны
соответствует максимум при 210 нм , так как является наиболее широким и
характеризуется большей величиной интенсивности поглощения. Для
выбранной длины волны величина ε имеет значение ε
210
= 4,0·10
3
± 0,20·10
3
л/моль·см .
Для построения градуировочного графика используют исходный
раствор гистидина с концентрацией 0,20·10
-3
моль/ дм
3
. Линейность
концентрационной зависимости величины абсорбционности в области 0,2-
0,9 соблюдается в интервале концентраций гистидина 0,04·10
-3
– 0,20·10
-3
моль/ дм
3
(рис.20). 
                                        45


       −3                                                 Ри с .18.
   ε⋅10 ,
   л/моль⋅см
                                                          Зави с и м ос т ь
     5,8                                                  м оляр н ого
                                                          коэффи ци ен т а
     5,6                                                  с вет опогло щен и я
                                                          от             вр ем ен и
     5,4                                                  вы дер ж и ван и я
                                                          р ас т вор а
     5,2                                                  т р и пт оф ан а        с
                                                          кон цен т р аци ей
     5,0                                                  0,12·103 м оль/дм 3,
                                                          р Н =5,77,
     4,8
            0   20   40      60    80    100     120      λ = 279 н м .
                                               τ, час




                          6.4. О пределение гист идина

     Д ля спектра поглощ ени я ги сти д и на (ри с.19) характерно нали чи ед ву х
макси му мов поглощ ени я при 190 и 210 нм. А нали ти ческой д ли не волны
соответству ет макси му м при 210 нм, так как являетсянаи болееш и роки м и
характери зу ется больш ей вели чи ной и нтенси вности поглощ ени я. Д ля
вы бранной д ли ны волны вели чи на εи меет значени еε210 = 4,0·10 ± 0,20·10
                                                                    3           3

л/моль·см.
     Д ля построени я град у и ровочного граф и ка и спользу ю т и сход ны й
раствор ги сти д и на с концентраци ей 0,20·10-3 моль/д м3 . Л и нейность
концентраци онной зави си мости вели чи ны абсорбци онности в области 0,2-
0,9 соблю д ается в и нтервале концентраци й ги сти д и на 0,04·10-3 – 0,20·10-3
моль/д м3 (ри с.20).

Страницы