Иммунный ответ при вирусных инфекциях. Коваленко А.Л - 48 стр.

UptoLike

50
8,0 - 8,5 Lg ТЦИД 50/0,1 мл. В качестве ростовой и поддерживающей сре-
ды использовали среду Игла, содержащую 10 и 2 % сыворотки быка
соответственно.
Определение цитотоксичности препарата. Клетки в состоянии сфор-
мировавшегося монослоя (48 часов) в 96-луночном планшете обрабатыва-
ли различными разведениями химиопрепаратов и инкубировали в термо-
стате в течение 4 суток. За 50% ингибирующую дозу принимали такую
концентрацию,
которая вызывала нарушение морфологии у 50% клеток на
4-е сутки наблюдения. Использовали по 8 лунок на каждое разведение пре-
парата.
Оценка противовирусного действия химиопрепарата. Монослой кле-
ток предварительно отмытый раствором Хенкса, заражали вирусом в дозе
100 ТЦД
50
в объеме 100 мкл на лунку. После 1,5-часовой адсорбции при
37° С вирус удаляли, а в культуру клеток (монослой) добавляли среду под-
держки, содержащую препарат в различных концентрациях в объеме 200
мкл на лунку.
Вирусоспецифическое цитотоксическое действие (ЦПД) оценивали
ежедневно по общепринятому методу.
Об эффективности препарата судили по снижению инфекционного
титра вируса
по сравнению с контрольными культурами без препаратов.
Результаты изучения цитотоксического действия циклоферона приве-
дены в табл. 13.
Таблица 13
Влияние различных концентраций циклоферона
на клеточные культуры ЛЭЧ
Препарат,
использованный
Культура
ткани
Наличие ЦПД* при
концентрации препарата, мкг/мл
для тестирования 3000 1500 750 375 187 93 46
Циклоферон ЛЭЧ 5/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8
4/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8
Ганцикловир ЛЭЧ 8/8 5/8 3/8 0/8 0/8 0/8 0/8
8/8 6/8 2/8 0/8 0/8 0/8 0/8
* Числитель - число культур с наличием ЦПД; знаменатель - общее число ис-
пользованных культур.
Как видно из таблицы, препарат обладал низкой токсичностью в отно-
шении обеих клеточных культур и значительно превосходил по этому по-
казателю референс-препарат ганцикловир. Антивирусная активность цик-
лоферона в отношении ЦМВ уступала активности ганцикловира (табл. 14).
Таблица 14
Активность циклоферона и ганцикловира
8,0 - 8,5 Lg ТЦИД 50/0,1 мл. В качестве ростовой и поддерживающей сре-
ды использовали среду Игла, содержащую 10 и 2 % сыворотки быка
соответственно.
    Определение цитотоксичности препарата. Клетки в состоянии сфор-
мировавшегося монослоя (48 часов) в 96-луночном планшете обрабатыва-
ли различными разведениями химиопрепаратов и инкубировали в термо-
стате в течение 4 суток. За 50% ингибирующую дозу принимали такую
концентрацию, которая вызывала нарушение морфологии у 50% клеток на
4-е сутки наблюдения. Использовали по 8 лунок на каждое разведение пре-
парата.
    Оценка противовирусного действия химиопрепарата. Монослой кле-
ток предварительно отмытый раствором Хенкса, заражали вирусом в дозе
100 ТЦД50 в объеме 100 мкл на лунку. После 1,5-часовой адсорбции при
37° С вирус удаляли, а в культуру клеток (монослой) добавляли среду под-
держки, содержащую препарат в различных концентрациях в объеме 200
мкл на лунку.
    Вирусоспецифическое цитотоксическое действие (ЦПД) оценивали
ежедневно по общепринятому методу.
    Об эффективности препарата судили по снижению инфекционного
титра вируса по сравнению с контрольными культурами без препаратов.
    Результаты изучения цитотоксического действия циклоферона приве-
дены в табл. 13.
                                                               Таблица 13
              Влияние различных концентраций циклоферона
                      на клеточные культуры ЛЭЧ

     Препарат,       Культура              Наличие ЦПД* при
  использованный      ткани          концентрации препарата, мкг/мл
 для тестирования               3000 1500 750 375 187          93     46
Циклоферон             ЛЭЧ       5/8  0/8   0/8   0/8   0/8    0/8    0/8
                                 4/8  0/8   0/8   0/8   0/8    0/8    0/8
Ганцикловир            ЛЭЧ       8/8  5/8   3/8   0/8   0/8    0/8    0/8
                                 8/8  6/8   2/8   0/8   0/8    0/8    0/8
* Числитель - число культур с наличием ЦПД; знаменатель - общее число ис-
пользованных культур.
   Как видно из таблицы, препарат обладал низкой токсичностью в отно-
шении обеих клеточных культур и значительно превосходил по этому по-
казателю референс-препарат ганцикловир. Антивирусная активность цик-
лоферона в отношении ЦМВ уступала активности ганцикловира (табл. 14).
                                                               Таблица 14
                Активность циклоферона и ганцикловира

50