Физико-химические основы биолюминесцентного анализа - 58 стр.

UptoLike

Рубрика: 

115
4.4.3. Изучение реакции биотестов на «цветение» водоема
сине-зелеными водорослями
По мнению многих авторов, именно «цветение» сине-
зеленых водорослей характеризует состояние экосистемы. Так,
на примере фенола было показано, что «цветение» сине-
зеленых водорослей определяет скорость и кинетику биодегра-
дации ксенобиотиков. Кроме того, известно, что метаболиты
сине-зеленых водорослей являются токсичными
, поэтому в
систему ферментативных тестов необходимо включить биотес-
ты, чувствительные к данным веществам.
Поскольку в исследуемом водоемецветения сине-
зеленых не наблюдалось, для моделирования реакции биотес-
тов нацветениесине-зеленых использовали лабораторную
культуру сине-зеленой микроводоросли Spirulina platensis.
Динамика показаний биотестов и роста микроводорослей
Spirulina platensis представлена на рис.32. Видно, что
в течение
всего периода роста водорослей реакция биотеста, основанного
на биферментной реакции, менялась незначительно. Из дан-
ных, полученных для триферментных систем, видно, что в те-
чение первых дней роста микроводоросли выделяют
метаболиты, ингибирующие активность АДГ и стимулирую-
щие активность трипсина. После четырех дней роста актив-
ность трипсина в присутствии культуральной среды
микроводорослей не меняется. Реакция биотестов на культу-
ральную среду микроводорослей была одинаковой для всех
трех повторностей, что говорит о хорошей повторяемости фер-
ментативных биотестов. Наиболее чувствительным оказался
биотест, основанный на АДГ: на 8-й и 9-й дни роста водорос-
лей ингибирование триферментной реакции с АДГ достигало
95%.
Два компонента культуральной среды микроводорослей
могут менять реакцию биотестов. Это минеральные соли, вхо-
дящие в состав питательной среды водорослей, и метаболиты,
выделяемые водорослями в процессе жизнедеятельности.
116
T, c
0
10
20
30
40
I/Io
, %
0
20
40
60
80
100
120
день эксперимента
0 102030405060
t, c
0
50
100
150
200
добавлен бензохинон
1
2
3
1
2, 3
1
2, 3
Рис 32. Рост биомассы водорослей Spirulina platensis и реакция
ферментативных биолюминесцентных биотестов на культуральную среду
данной микроводоросли:
- действие питательной среды в
начале эксперимента; , , три повторности