Физико-химические основы биолюминесцентного анализа. Кудряшева Н.С - 60 стр.

UptoLike

Рубрика: 

119
Вопросы ко главе 2
1.
Что такое биотесты? Каковы перспективы их использо-
вания?
2.
Какие элементарные физические процессы Вы можете
перечислить?
3.
Что такое сенсибилизированная флуоресценция? Как ее
можно получить в биолюминесцентной реакции?
4.
Как проявляется «эффект тяжелого атома» в билюми-
несцентнной реакции?
5.
Каков механизм влияния катионов металлов на интен-
сивность биолюминесценции ферментативной реакции?
6.
Каков механизм изменения кинетики биолюминесцент-
ной реакции органическими окислителями?
Вопросы к главе 3
1.
Что такое биотестирование? Каковы преимущества био-
тестов по сравнению с химическим анализом?
2.
Какие светящиеся организмы используются в биотести-
ровании?
3.
Какие основные параметры свечения используются для
определения биологической опасности различных сред?
4.
Какая существует связь между показаниями биотестов и
вредным воздействием токсикантов на организм челове-
ка?
5.
Какие существуют способы увеличения чувствительно-
сти биотестов?
6.
Какие модификации ферментативных биолюминесцент-
ных биотестов Вы знаете?
7.
Почему при проведении биотестирования следует ис-
пользовать систему биотестов?
120
ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА N1 (2 ЧАСА).
КИНЕТИКА БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ РЕАКЦИИ,
КАТАЛИЗИРУЕМОЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ
ЛЮЦИФЕРАЗОЙ
Схема химической реакции, катализируемая ферментом
«бактериальная люцифераза», представлена на рис.32.
NH
N
H
3
C
H
3
C
N
N
H
H
O
O
R
+
C
+ O
2
O
R
1
NH
N
H
3
C
H
3
C
N
N
O
O
R
+
C
+ H
2
O
R
1
O
Люцифераза
Люцифераза
Рис.32. Биолюминесцентная реакция и ее компоненты
В данной реакции происходит окисление восстановленного
флавинмононуклеотида (FMNН
2
) и длинноцепочечного алифа-
тического альдегида кислородом воздуха до окисленного фла-
винмононуклеотида (FMN) и жирной кислоты. Каталлизатор
бактериальная люцифераза. В предыдущих исследованиях по-
казано, что спектр биолюминесценции, соответствующий дан-
ной реакции, совпадает со спектром фотолюминесценции
молекулы гидроксифлавина, которая обнаружена в качестве
промежуточного продукта этой реакции. В связи с этим пред-