Составители:
Рубрика:
49
веществ. В качестве стерилизаторов используют ртутьсодержащие и
хлорсодержащие вещества или окислители со специально подобранными
сроками экспозиции. После стерилизации любым раствором растительные
ткани промывают в 3…4 порциях стерильной дистиллированной воды по
10…15 минут каждый раз.
Если указанные способы стерилизации не позволяют растительным
тканям избавиться от внутренней инфекции, в состав питательной среды
вводят антибиотики (тетрациклин, бензилпенициллин и др.) в
концентрации 100…200 мг/л. Это в первую очередь относится к
древесным растениям, которым свойственно накопление внутренней
инфекции.
После стерилизации из семян извлекают зародыши, а с вегетативных
спящих почек удаляют кроющие чешуйки до обнажения меристемы с
двумя парами листовых зачатков. Изолированные экспланты переносят на
заранее приготовленную стерильную питательную среду. Пробирки или
чашки Петри помещают в камеру фитотрона или в световую комнату, где
поддерживают указанные выше условия выращивания.
Помимо выращивания каллусной ткани поверхностным способом
(на агаре) в практике используется и другой способ культивирования – в
жидкой среде, в результате которого образуется суспензия. Оптимальная
скорость перемешивания, обеспечивающая получение суспензии –
100…120 оборотов в минуту. Первичную суспензию фильтруют через 1…2
слоя стерильной марли, нейлона или металлические сита, что позволяет
избавиться от крупных, плотных кусков каллусной ткани. В суспензии
наращивание каллусной ткани происходит в два раза быстрее. Это имеет
огромное значение при получении веществ вторичного синтеза –
алкалоидов, терпенов, гликозидов, полисахаридов, эфирных масел и др.
Возможна автоматизация процессов подачи нового питательного раствора
и удаление старого, что существенно облегчает процесс промышленного
производства.
Цикл микрочеренкования повторяется многократно, поэтому
микроклонирование позволяет получить достаточно высокий коэффициент
размножения: 10
5
…10
6
растений в год из одной меристемы для
травянистых растений; 10
5
…10
4
– для кустарников и плодовых культур;
10
4
– для хвойных пород.
На первом этапе, как правило, используют среду, содержащую
минеральные соли по рецепту Мурасига и Скуга, а также различные
биологически активные вещества и стимуляторы роста (ауксины,
цитокинины) в разных сочетаниях в зависимости от объекта.
Основой создания клеточных культур является каллусогенез.
Каллус – это неорганизованно растущая, аморфная ткань, которая
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 47
- 48
- 49
- 50
- 51
- …
- следующая ›
- последняя »
