Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 44 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

44
ипритом ), а просмотр препаратов с помощью флуоресцентного микроско-
па. Метод впервые предложил в 1968 г. Т. Касперссон (Швеция). В микро-
скопе видны поперечные светящиеся (флуоресцирующие) полосы (бэнды),
расположение которых характерно для каждой хромосомы.
Рисунок 16. Дифференциально окрашенные (G-методом – слева и R-
методом – справа) 6-я, 7-я и Х -хромосомы человека, трудно идентифици-
руемые при сплошном окрашивании. Хромосомы обозначены согласно
Парижской классификации.
Позже было выявлено, что дифференциальное окрашивание можно
осуществлять без флуоресцентных красителей, а препараты изучать под
обычным световым микроскопом.
2) G-метод (Giemza, окрашивание с помощью красителя Гимза в со-
четании с дополнительными процедурами, способствующими адсорбции
красителя на определенных участках ). G-метод наиболее часто применя-
ется для маркировки и идентификации хромосом (рисунок 16).
К разновидностям дифференциального окрашивания по методу Гим-
зы относятся R-окраска и C-окраска. В этом случае изменяется время и
условия инкубации препаратов, окрашенных по методу Гимзы.
3) R-метод (reverse, оборотные ) – сегментация хромосом обратная
G-сегментации. С помощью этого способа окрашивания удается четко оп-
ределять теломерные районы хромосом.
4) С -метод (constitutive heterochromatin, или centromeric
heterochromatin). Применяется для установления локализации участков ге-
терохроматина, в частности, в центромерных и околоцентромерных участ-
ках . Позволяет выявлять структурный (конститутивный , т.е. постоянно
конденсированный ) гетерохроматин, что дает возможность оценить хро-
мосомный полиморфизм , т.е. индивидуальные отличия по отдельным хро-
мосомам . С помощью C-метода описаны кариотипы основных хлебных
злаков (пшеница, рожь , ячмень и др.). Он был использован для идентифи-
кации и анализа хромосом родственных геномов пшеницы и дикорастущих
сородичей, с помощью него выявлено происхождение культурной мягкой
пшеницы (рисунок 17).
Сопоставление методов дифференциального окрашивания показало,
что все они выявляют в принципе одни и те же структуры, но каждый из
них специфичен в отношении определенных хромосомных сегментов. 
                                        44
ипритом), апрос мотр пре паратов с помощ ь ю фл уоре с це нтного микрос ко-
па. М е тод впе рвые пре дл ожил в 1968 г. Т. Кас пе рс с он (Ш ве ция). В микро-
с копе видны попере чные с ве тящ ие с я(фл уоре с цирую щ ие ) пол ос ы (бэнды),
рас пол оже ние которых характе рно дл якаждой хромос омы.




       Р ис унок 16. Д иффе ре нциал ь но окраш е нные (G-мет о до м – с л е ваи R-
мет о до м – с права) 6-я, 7-я и Х -хромос омы че л овека, трудно иде нтифици-
руе мые при с пл ош ном окраш ивании. Х ромос омы обозначе ны с огл ас но
П арижс кой кл ас с ификации.

        П озже был о выявл е но, что диффе ре нциал ь ное окраш ивание можно
ос ущ е с твл ять бе з фл уоре с це нтных крас ите л ей , а пре параты изучать под
обычным с ве товым микрос копом.
        2) G-мет о д (Giemza, окраш ивание с помощ ь ю крас ите л яГимзав с о-
че тании с допол ните л ь ными процедурами, с пос обс твую щ ими адс орбции
крас ите л я на опре де л е нных учас тках). G-мет о д наибол е е час то приме ня-
е тс ядл ямаркировки и иде нтификации хромос ом (рис унок 16).
        К разновиднос тям диффе ре нциал ь ного окраш ивания по ме тоду Гим-
зы относ ятс я R-окрас ка и C-окрас ка. В этом с л учае изме няе тс я вре мя и
ус л овияинкубации препаратов, окраш е нных по ме тоду Гимзы.
        3) R-мет о д (reverse, оборотные ) – с е гме нтация хромос ом обратная
G-с е гме нтации. С помощ ь ю этого с пос обаокраш ивания удае тс я че тко оп-
ре де л ять те л оме рные рай оны хромос ом.
        4) С -мет о д (constitutive heterochromatin, ил и centromeric
heterochromatin). П риме няе тс я дл я ус тановл е ния л окал изации учас тков ге -
те рохроматина, в час тнос ти, в це нтроме рных и окол оце нтроме рных учас т-
ках. П озвол яе т выявл ять с труктурный (конс титутивный , т.е . пос тоянно
конде нс ированный ) ге те рохроматин, что дае т возможнос ть оце нить хро-
мос омный пол иморфизм, т.е . индивидуал ь ные отл ичия по отде л ь ным хро-
мос омам. С помощ ь ю C-ме тода опис аны кариотипы ос новных хл е бных
зл аков (пш е ница, рожь , ячме нь и др.). О н был ис пол ь зован дл я иде нтифи-
кации и анал изахромос ом родс тве нных ге номов пш е ницы и дикорас тущ их
с ородиче й , с помощ ь ю не го выявл е но проис хожде ние кул ь турной мягкой
пш е ницы (рис унок 17).
        Сопос тавл е ние ме тодов диффе ре нциал ь ного окраш ивания показал о,
что вс е они выявл яю т в принципе одни и те же с труктуры, но каждый из
них с пе цифиче н в отнош е нии опре де л е нных хромос омных с е гме нтов.

Страницы