Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 46 стр.

                                             46
нин (рис унок 18). М е с та гибридизации выявл яю т с помощ ь ю фл уоре с -
це нтного ил и обычного с ве тового микрос копа. Ч ащ е ис пол ь зуе тс я второй
с пос об как бол е е дос тупный и бе звре дный .
                                                           Р ис унок 18. Гибриди-
                                                     зация in situ на хромос омах
                                                     эгил опс а (Ae.     squarrosa,
                                                     2n=2x=14) – одного из пре д-
                                                     ков кул ь турной пш е ницы
                                                     [Бадае ва, 2001]. Стре л ками
                                                     указаны ме с та гибридизации с
                                                     митотиче с кими хромос омами 1
                                                     и 5.

        П риме не ние данного ме тодапозвол яе т пол учить с ве де нияо нал ичии
ил и отс утс твии того ил и иного ге на(наприме р, де фе ктного, вызываю щ е го
нас л е дс тве нное забол е вание у че л ове ка ил и наоборот ге на, кодирую щ е го
хозяй с тве нно-це нные признаки у рас те ний ), нал ичие Д Н К вирус а, разл ич-
ных хромос омных пе ре с трое к и др.
        4. Х ро мо со мн ый пэйн т и н г = “хро мо со мн а я ж и в о пи сь ” = мн о го цв ет -
н а я флуо ресцен т н а я ги бри ди за ци я.
        В 1990 –х гг. появил ис ь новые мощ ные ме тоды, в ос нове которых
л е жит фл уоре с це нтная гибридизация нукл е иновых кис л от in situ (FISH-
гибридизация). Э то с вязано с приме не ние м новых, бол е е эффе ктивных
фл уорохромов и нового оборудования дл я анал изамикрос копиче с ких изо-
бражений – цифровых фотоаппаратов, с ое диненных с микрос копом и ком-
пь ю те ром (CCD-каме р) вме с то фотокаме р. О дним из наибол е е разре ш аю -
щ их ме тодов явл яе тс я мн о го цвет н а я флуо ресцен т н а я ги бри ди за ци я ил и
хро мо со мн ый пейн т и н г (хромос омнаяживопис ь ).
        Д л я пол уче ния многоцве тных изображе ний ис пол ь зую т разл ичные
фл уорохромы, которыми ме тят разные зонды Д Н К. И нформацияоб инте н-
с ивнос ти с ве че ния каждого фл уорохромазапис ывае тс я накомпь ю те ре от-
де л ь но, и каждому из таких изображе ний прис ваивае тс яс вой с обс тве нный
пс е вдоцве т. О дновре ме нное ис пол ь зование не с кол ь ких фл уорохромов по-
звол яе т пол учить не с кол ь ко пс е вдоцве тов. Н априме р, е с л и фрагме нт хро-
мос омы, окраш е нный фл уорохромом а , буде т давать один пс е вдоцве т,
фрагме нт, окраш е нный фл уорохромом b - другой , то фрагме нт, окраш е н-
ный a и b одновре ме нно, буде т давать тре тий пс е вдоцве т. И с пол ь зование n
фл уорохромов позвол яе т одновре ме нно опре де л ить л окал изацию 2n-1
фрагме нтов Д Н К. Н априме р, приме не ние пяти фл уорохромов дае т воз-
можнос ть анал изировать ре зул ь таты одновре ме нной гибридизации in situ
31 фрагме нтаД Н К. Н оваяприборнаябазапозвол яе т ре гис трировать с ве рх-
с л абые с ве товые с игнал ы, не дос тупные гл азу че л ове каи с ве товые с игнал ы
с дл иной вол ны, выходящ ими за пре де л ы видимого с ве та. П ри ис пол ь зо-
вании тре х фл уорохромов каждую хромос ому че л ове каможно окрас ить в