Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 8 стр.

UptoLike

8
Апертурой характеризуются не только объективы, но и конденсор
микроскопа. Их величины указываются на оправе объективов и конденсо-
ра и должны совпадать (принцип Келера). В противном случае возможно-
сти объектива реализуются не полностью.
Главной характеристикой микроскопа как оптической системы, оп-
ределяющей ее качество, является разрешающая способность. Под разре -
шающей способностью объектива микроскопа (d) понимают тот наимень-
ший диаметр частицы, которую мы можем увидеть в микроскоп.
Разрешающая способность невооруженного глаза человека равна
примерно 0,1-0,2 мм или 100-200 мкм (1 мм = 1000 мкм ). При помощи
сильной лупы можно рассматривать объекты величиной до 0,01 мм (10
мкм ). Световой микроскоп может повысить (к невооруженному глазу че -
ловека) разрешающую способность в 1000 раз . Обычно максимальная раз -
решающая способность микроскопа не выше 0,2-0,35 мкм или 200-350 нм
(1 мкм =1000 нм - нанометров), т.е. в световом микроскопе можно видеть
частицы размером 0,2-0,35 мкм .
Разрешающая способность объектива зависит от длины волны (чем
она меньше, тем меньшего размера деталь мы можем увидеть ) и от нуме-
рической апертуры объектива А (чем она выше, тем выше разрешение) и
вычисляется по формуле:
A
d
61,0
=
λ
, где d разрешающая способность
объектива; λ - длина волны используемого источника света, мкм ; А - чи -
словая апертура. Так , при использовании объектива масляно-
иммерсионного с увеличением 90
х
и апертурой (А ) =1,4, при освещении
обычным светом λ=0,55 мкм , наименьший диаметр видимых частиц со-
ставляет .24,0
4,1
61,055,0
мкм
мкм
d =
= Уменьшая длину волны света (ис -
пользуя, например, синие светофильтры - λ=0,47 мкм или коротковолно-
вый ультрафиолетовый свет - λ=0,26-0,28 мкм ) можно увидеть и изучить
более мелкие структуры и детали строения, чем при освещении обычным
белым светом .
Каждый объектив характеризуется определенной величиной рабоче-
го расстояния. Объективы малого увеличения имеют максимальное рабо-
чее расстояние от объектива до препарата и наибольшее поле зрения, по-
этому с них начинают исследования, а затем переходят на объективы с
большим увеличением. При работе с микроскопом важное значение имеет
толщина покровного и предметного стекол . Качественное изображение на-
блюдается при толщине покровного стекла 0,17 мм, предметного 1,2 мм.
Окуляр устроен значительно проще объектива. Нередко он состоит
всего из двух линз. Увеличение окуляра у микроскопа обычно составляет
7х, 10х, 15х. Цифровые видеоокуляры, широко используемые в последние
годы, позволяют вывести изображение на экран монитора и провести его
компьютерную обработку, получить фотографии высокого качества.
                                            8
        А пе ртурой характе ризую тс я не тол ь ко объ е ктивы, но и конде нс ор
микрос копа. Их ве л ичины указываю тс я наоправе объ е ктивов и конде нс о-
раи дол жны с овпадать (принцип Ке л е ра). В противном с л учае возможно-
с ти объ е ктиваре ал изую тс яне пол нос ть ю .
        Гл авной характе рис тикой микрос копа как оптиче с кой с ис те мы, оп-
ре де л яю щ е й е е каче с тво, явл яе тс я ра зреш а юща я спо со бн о ст ь . П од ра зре-
ш а ющей спо со бн о ст ь ю объ е ктивамикрос копа(d) понимаю т тот наиме нь -
ш ий диаме тр час тицы, которую мы може м увиде ть в микрос коп.
        Р азре ш аю щ ая с пос обнос ть не вооруже нного гл аза че л ове ка равна
приме рно 0,1-0,2 мм ил и 100-200 мкм (1 мм = 1000 мкм). П ри помощ и
с ил ь ной л упы можно рас с матривать объ е кты ве л ичиной до 0,01 мм (10
мкм). Све товой микрос коп може т повыс ить (к не вооруже нному гл азу че -
л ове ка) разре ш аю щ ую с пос обнос ть в 1000 раз. О бычно макс имал ь ная раз-
ре ш аю щ ая с пос обнос ть микрос копане выш е 0,2-0,35 мкм ил и 200-350 нм
(1 мкм=1000 нм - наноме тров), т.е . в с ве товом микрос копе можно виде ть
час тицы разме ром 0,2-0,35 мкм.
        Р азре ш аю щ ая с пос обнос ть объ ектива завис ит от дл ины вол ны (че м
онаме нь ш е , те м ме нь ш е го разме раде тал ь мы може м увиде ть ) и от нуме -
риче с кой апе ртуры объ е ктива– А (че м онавыш е , те м выш е разре ш е ние ) и
                                       λ ⋅ 0,61
вычис л яе тс я по формул е : d =                , где d – разре ш аю щ ая с пос обнос ть
                                           A
объ е ктива; λ - дл ина вол ны ис пол ь зуе мого ис точника с ве та, мкм; А - чи-
с л овая апе ртура. Так, при ис пол ь зовании объ е ктива мас л яно-
имме рс ионного с уве л иче ние м 90х и апе ртурой (А ) =1,4, при ос ве щ е нии
обычным с ве том λ=0,55 мкм, наиме нь ш ий диаме тр видимых час тиц с о-
                  0,55 мкм ⋅ 0,61
с тавл яе т d =                   = 0,24 мкм. Уме нь ш ая дл ину вол ны с ве та (ис -
                        1,4
пол ь зуя, наприме р, с иние с ве тофил ь тры - λ=0,47 мкм ил и коротковол но-
вый ул ь трафиол е товый с ве т - λ=0,26-0,28 мкм) можно увиде ть и изучить
бол е е ме л кие с труктуры и де тал и с трое ния, че м при ос ве щ е нии обычным
бе л ым с ве том.
        Каждый объ е ктив характе ризуе тс я опре де л е нной ве л ичиной ра бо ч е-
го ра сст о ян и я. О бъ е ктивы мал ого уве л иче ния име ю т макс имал ь ное рабо-
че е рас с тояние от объ е ктивадо пре паратаи наибол ь ш е е пол е зре ния, по-
этому с них начинаю т ис с л е дования, а зате м пе ре ходят на объ е ктивы с
бол ь ш им уве л иче ние м. П ри работе с микрос копом важное значе ние име е т
тол щ инапокровного и пре дме тного с те кол . Каче с тве нное изображе ние на-
бл ю дае тс япри тол щ ине покровного с те кл а0,17 мм, пре дме тного – 1,2 мм.
        Окулярус трое н значите л ь но прощ е объ е ктива. Н е ре дко он с ос тоит
вс е го из двух л инз. Уве л иче ние окул ярау микрос копаобычно с ос тавл яе т
7х, 10х, 15х. Ц ифровые виде оокул яры, ш ироко ис пол ь зуе мые в пос л е дние
годы, позвол яю т выве с ти изображе ние на экран монитораи прове с ти е го
компь ю те рную обработку, пол учить фотографии выс окого каче с тва.