Изучение биологических объектов методами атомно-силовой микроскопии. Нагорнов Ю.С. - 27 стр.

UptoLike

Составители:

Рубрика:

ГЛАВА 2 ПРИМЕНЕНИЕ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ

БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ

2.1 Протоколы приготовления образцов молекул ДНК для измерения методом АСМ

Атомно-силовая микроскопия (АСМ) в настоящее активно используется для изучения

структурных особенностей биологических макромолекул (белков, ДНК), поскольку позволяет

получать изображения с разрешением в несколько нанометров [8-10]. Наряду с исследованием

сухих образцов, АСМ позволяет исследовать молекулы и в буферных растворах.

Для получения изображений методом АСМ, исследуемые объекты должны быть

зафиксированы на какой-либо поверхности. При исследовании молекул ДНК в качестве

подложки обычно используется кристаллическая слюда, поверхность которой является

атомарно-гладкой. Для того чтобы прикрепить отрицательно заряженные молекулы ДНК на

слюду, поверхность которой в воде также имеет отрицательный заряд, существует ряд

методов, обзор которых приведен в данной заметке. Приводимые в качестве иллюстраций

АСМ изображения были получены на приборах серии Solver и Ntegra компании NT-MDT

полуконтактным методом на воздухе и в жидкости.

Наиболее простым способом является добавление в буфер ионов двухвалентных металлов,

которые играют роль мостиков между отрицательно заряженными поверхностью слюды и

молекулой ДНК. Согласно работе [11], для крепления молекул ДНК наиболее подходят ионы

никеля, кобальта и цинка, они обеспечивают надежное связывание с поверхностью слюды,

достаточное для проведения измерений в жидкости.

а) б)