Изучение биологических объектов методами атомно-силовой микроскопии. Нагорнов Ю.С. - 42 стр.

UptoLike

Составители:

Рубрика:

снятия силовых кривых. В данном случае эритроциты на воздухе исследовали полуконтактным

методом.

При получении изображений мембраны с высоким разрешением параллельно получали два

изображения: в режимах HIGH и MAG (error mode). Использование режима фазового

контраста при работе на воздухе не давало дополнительной информации и, поэтому, не

применялось. Измерения проводили зондами NSG11 компании NT MDT [2].

Исследования проводились на наборе образцов, имеющих разное происхождение, с разным

временем воздействия вируса на эритроциты [2]. Для фиксации времени взаимодействия

проводилась обработка суспензии эритроцит-вирус добавлением к ней параформальдегида до

конечной концентрации 2%. Чтобы уменьшить скорость вирус-клеточного взаимодействия

процесс приготовления образцов до этапа фиксации проводился при температуре 4-6

При исследовании на воздухе в оптическом микроскопе, на столике которого размещен

АСМ сканер, оценивалось состояние эритроцитов и выбиралось поле для изучения. Благодаря

достаточно большой площади скана (70х70 мкм), при первом сканировании в кадр попадало

значительное число (десятки) эритроцитов, что давало возможность оценить их состояние

(изменения формы), выбрать объект для подробного исследования, а также переходить с

одного объекта на другой не перемещая зонд вдоль образца.

a) б)

Рис. 28. Влияние нарушений в методике приготовления эритроцитов для АСМ на их форму: а)

нарушения рН при промывке; б) влияние гипертонированного раствора [2].

На рис.28 представлены нарушения формы эритроцитов при неправильном обращении с

суспензией [2]. Нарушение рН (в данном случае закисление раствора) приводит к нарушению

целостности мембраны, что провоцирует округление эритроцитов и запуск процесса слияния