Переход спираль-клубок в молекуле ДНК. - 9 стр.

UptoLike

Рубрика: 

8. Провести плавление ДНК. Для этого выбрать оптимальные параметры
регистрации в режиме развертки по времени «Т».
Установить в контактном термометре температуру . Включить на
нагрев и провести регистрацию поглощения раствора на длине волны 260 нм во
время нагревания на самописце. Температуру кюветы регистрировать по
термосопротивлению с помощью предварительного отградуированного
прибора Е-7-13.
C
o
90
9. После окончания «плавления» прописать спектр раствора ДНК в диапазоне
210-230 нм, совместив его со спектром, снятым при комнатной температуре.
Сравнить эти два спектра.
3.6 Обработка экспериментальных результатов
1. Построить спектры спиральной и расплавленной ДНК. На основании
полученных спектров построить график зависимости прироста поглощения
от длины воны (гиперхромный эффект).
2. Построить кривую плавления ДНК. Определить ширину интервала
плавления и температуру плавления.
3. По формуле (13) вычислить содержания ГЦ-пар в ДНК. Оценить изменение
H
Δ при плавлении, свободную энергию межплоскостных связей.
3.7 Контрольные вопросы
1. Строение двойной спирали ДНК. Взаимодействия, стабилизирующие
двойную спираль.
2. Элементарная теория перехода спираль-клубок в ДНК.
3. Кривая плавления ДНК, параметры кривой плавления. Фактор
кооперативности и ширина перехода спираль-клубок.
4. Зависимость температуры плавления ДНК от содержания ГЦ-пар.
5. Влияние ионной силы и рН на стабильность двойной спирали ДНК
6. Гиперхромный эффект.
7. Устройство двухлучевого спектрофотометра.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот /Под. Ред.
Ю.С. Лазуркина М. «Наука» 1967. С.119
2. А.Ф.Веденов, А.М.Дыхне, М.Д. Франк-Каменецкий / УФН, 105 Вып 3 С.
479-519, 1971.
3. Л.Д. Ландау, Е.М. Статистическая физика м. Наука, 1982 С.100.
КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ
СПЕКТРОФОТОМЕТРА «ПЕРКИН-ЭЛЬМЕР 552»
9
8. Провести плавление ДНК. Для этого выбрать оптимальные параметры
   регистрации в режиме развертки по времени «Т».
   Установить в контактном термометре температуру 90 o C . Включить на
нагрев и провести регистрацию поглощения раствора на длине волны 260 нм во
время нагревания на самописце. Температуру кюветы регистрировать по
термосопротивлению с помощью предварительного отградуированного
прибора Е-7-13.
9. После окончания «плавления» прописать спектр раствора ДНК в диапазоне
   210-230 нм, совместив его со спектром, снятым при комнатной температуре.
   Сравнить эти два спектра.

3.6 Обработка экспериментальных результатов

1. Построить спектры спиральной и расплавленной ДНК. На основании
   полученных спектров построить график зависимости прироста поглощения
   от длины воны (гиперхромный эффект).
2. Построить кривую плавления ДНК. Определить ширину интервала
   плавления и температуру плавления.
3. По формуле (13) вычислить содержания ГЦ-пар в ДНК. Оценить изменение
   ΔH при плавлении, свободную энергию межплоскостных связей.

3.7 Контрольные вопросы

1. Строение двойной спирали ДНК. Взаимодействия, стабилизирующие
   двойную спираль.
2. Элементарная теория перехода спираль-клубок в ДНК.
3. Кривая плавления ДНК, параметры кривой плавления. Фактор
   кооперативности и ширина перехода спираль-клубок.
4. Зависимость температуры плавления ДНК от содержания ГЦ-пар.
5. Влияние ионной силы и рН на стабильность двойной спирали ДНК
6. Гиперхромный эффект.
7. Устройство двухлучевого спектрофотометра.


                        СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот /Под. Ред.
   Ю.С. Лазуркина М. «Наука» 1967. С.119
2. А.Ф.Веденов, А.М.Дыхне, М.Д. Франк-Каменецкий / УФН, 105 Вып 3 С.
   479-519, 1971.
3. Л.Д. Ландау, Е.М. Статистическая физика м. Наука, 1982 С.100.

           КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ
           СПЕКТРОФОТОМЕТРА «ПЕРКИН-ЭЛЬМЕР 552»

                                     9