ВУЗ:
Рубрика:
8. Провести плавление ДНК. Для этого выбрать оптимальные параметры
регистрации в режиме развертки по времени «Т».
Установить в контактном термометре температуру . Включить на
нагрев и провести регистрацию поглощения раствора на длине волны 260 нм во
время нагревания на самописце. Температуру кюветы регистрировать по
термосопротивлению с помощью предварительного отградуированного
прибора Е-7-13.
C
o
90
9. После окончания «плавления» прописать спектр раствора ДНК в диапазоне
210-230 нм, совместив его со спектром, снятым при комнатной температуре.
Сравнить эти два спектра.
3.6 Обработка экспериментальных результатов
1. Построить спектры спиральной и расплавленной ДНК. На основании
полученных спектров построить график зависимости прироста поглощения
от длины воны (гиперхромный эффект).
2. Построить кривую плавления ДНК. Определить ширину интервала
плавления и температуру плавления.
3. По формуле (13) вычислить содержания ГЦ-пар в ДНК. Оценить изменение
H
Δ при плавлении, свободную энергию межплоскостных связей.
3.7 Контрольные вопросы
1. Строение двойной спирали ДНК. Взаимодействия, стабилизирующие
двойную спираль.
2. Элементарная теория перехода спираль-клубок в ДНК.
3. Кривая плавления ДНК, параметры кривой плавления. Фактор
кооперативности и ширина перехода спираль-клубок.
4. Зависимость температуры плавления ДНК от содержания ГЦ-пар.
5. Влияние ионной силы и рН на стабильность двойной спирали ДНК
6. Гиперхромный эффект.
7. Устройство двухлучевого спектрофотометра.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот /Под. Ред.
Ю.С. Лазуркина М. «Наука» 1967. С.119
2. А.Ф.Веденов, А.М.Дыхне, М.Д. Франк-Каменецкий / УФН, 105 Вып 3 С.
479-519, 1971.
3. Л.Д. Ландау, Е.М. Статистическая физика м. Наука, 1982 С.100.
КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ
СПЕКТРОФОТОМЕТРА «ПЕРКИН-ЭЛЬМЕР 552»
9
8. Провести плавление ДНК. Для этого выбрать оптимальные параметры регистрации в режиме развертки по времени «Т». Установить в контактном термометре температуру 90 o C . Включить на нагрев и провести регистрацию поглощения раствора на длине волны 260 нм во время нагревания на самописце. Температуру кюветы регистрировать по термосопротивлению с помощью предварительного отградуированного прибора Е-7-13. 9. После окончания «плавления» прописать спектр раствора ДНК в диапазоне 210-230 нм, совместив его со спектром, снятым при комнатной температуре. Сравнить эти два спектра. 3.6 Обработка экспериментальных результатов 1. Построить спектры спиральной и расплавленной ДНК. На основании полученных спектров построить график зависимости прироста поглощения от длины воны (гиперхромный эффект). 2. Построить кривую плавления ДНК. Определить ширину интервала плавления и температуру плавления. 3. По формуле (13) вычислить содержания ГЦ-пар в ДНК. Оценить изменение ΔH при плавлении, свободную энергию межплоскостных связей. 3.7 Контрольные вопросы 1. Строение двойной спирали ДНК. Взаимодействия, стабилизирующие двойную спираль. 2. Элементарная теория перехода спираль-клубок в ДНК. 3. Кривая плавления ДНК, параметры кривой плавления. Фактор кооперативности и ширина перехода спираль-клубок. 4. Зависимость температуры плавления ДНК от содержания ГЦ-пар. 5. Влияние ионной силы и рН на стабильность двойной спирали ДНК 6. Гиперхромный эффект. 7. Устройство двухлучевого спектрофотометра. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот /Под. Ред. Ю.С. Лазуркина М. «Наука» 1967. С.119 2. А.Ф.Веденов, А.М.Дыхне, М.Д. Франк-Каменецкий / УФН, 105 Вып 3 С. 479-519, 1971. 3. Л.Д. Ландау, Е.М. Статистическая физика м. Наука, 1982 С.100. КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ СПЕКТРОФОТОМЕТРА «ПЕРКИН-ЭЛЬМЕР 552» 9
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 7
- 8
- 9
- 10
- 11
- …
- следующая ›
- последняя »