Лазерная техника и технология. Поляков В.Е - 65 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СЗТУ | Санкт-Петербург

Составители: 

Рубрика: 

66
производят следующим образом: препарат на предметном стекле высу-
шивают на воздухе и фиксируют нагреванием.
Затем его окрашивают, например, генцианом фиолетовым или кри-
сталлическим фиолетовым в течение 2 минут. Производят окраску в
растворе люголя в течение 2 минут, а затем краситель сливают. Промы-
вают спиртом до видимого обесцвечивания, а затем водой. Производят
контрастирующее окрашивание
фуксином в течение примерно 1 минуты
и промывают водой. Грамположительные бактерии окрашиваются в си-
ний цвет, а грамотрицательные – в красный цвет.
Из других методов используют метод окраски по Цилю-Нильсону,
позволяющий выявлять кислоустойчивые формы бактерий и споры (по-
коящиеся формы). Например, микробактерии туберкулеза окрашивают-
ся в красный цвет,, а некислоустойчивые клетки –
в синий цвет. При ок-
рашивании по Цилю-Нильсену препарат на предметном стекле высуши-
вают на воздухе и фиксируют нагреванием, затем наносят карболфук-
син, после чего нагревают стекло три раза до температуры кипения,
проводят дифференцирование с помощью спирта с добавлением HCl в
течение 1-2 минут.
Затем производят контролирующее окрашивание щелочным мети-
леновым синим
в течение 3 минут.
Кислоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет. Другие
бациллы – в синий цвет. Окрашивание можно производить с использо-
ванием метиленового синего Лефлера. Для чего несколько капель мети-
ленового синего Лефлера наносят на препарат и оставляют примерно на
2 минуты.
Затем препарат промывают водой и сливают краситель. Бактерии
окрашиваются в ярко
-синий цвет, человеческие клетки - в бледно-синий
цвет.
С позиций квантовой оптики процесс окрашивания бактерий1 мож-
но интерпретировать как искусственное наведение полос поглощения,
что приведет к существенному увеличению оптической плотности.
Вместе с тем, жесткие требования, обусловленные предельно до-
пустимыми концентрациями (1-5 бактерий в трех стомиллилитровых
пробах воды) не позволяют использовать традиционные
методы кало-
риметрии для их идентификации. В этом случае эффективным методом
инструментальной идентификации типа бактерий является метод внут-
рирезонаторной лазерной спектроскопии (см. лаб раб. №3), который со-
вместно с дифференциальными методами окраски по Граму и Цилю-
Нельсону позволит в конечном итоге создать новую классификацию
бактерий по полосам поглощения ( атлас линий поглощения
).

Страницы