Курс лекций по общей микробиологии и основам вирусологии. В 2 ч. Часть 1. Прунтова О.В - 132 стр.

      Поэтому кольцевидная генетическая карта кишечной палочки при-
обрела более сложную форму: к основной окружности пришлось добав-
лять дополнительные, чтобы на них нанести уточненную локализацию тех
генов, которые переносятся в течение одной и той же минуты.
      Помимо конъюгации, для составления хромосомной карты бактерий
использованы методы трансформации и трансдукции. Можно ожидать, что
в ближайшие годы составление хромосомной карты кишечной палочки бу-
дет завершено. Это позволит создать генетическую энциклопедию бакте-
рии, то есть связать все ее жизненные процессы с конкретными генами.
Так как различные приемы обмена наследственным материалом и методы
генной инженерии уже освоены, с их помощью можно будет осуществлять
любые генетические манипуляции с бактериальной клеткой, разумеется,
только в интересах человека, а не ему во вред.

          МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ ОРГАНИЗАЦИИ ГЕНОМОВ
      В настоящее время изучение геномов не ограничивается только кар-
тированием генов, стало возможным изучать последовательность распо-
ложения нуклеотидов в составе любого гена. Решающим шагом на пути к
решению этой проблемы явилось применение особых ферментов рестрик-
ционных эндонуклеаз и разработка метода клонирования генов.
      Рестрикционные эндонуклеазы (рестриктазы) - ферменты, расщеп-
ляющие ДНК в специфических участках нуклеотидных последовательно-
стей, которые они распознают. Эти ферменты обнаружены у многих бак-
терий. Они определяют и разрушают чужеродные молекулы ДНК, попа-
дающие в клетку, в том числе при инфицировании их фагами или при
трансформации. Таких ферментов обнаружено более 100, и каждый из них
распознает в ДНК специфическую последовательность из 4 - 6 нуклеоти-
дов. Каждая рестриктаза способна разрезать двойную спираль ДНК любой
длины. При этом образуется серия фрагментов, называемых рестрикцион-
ными фрагментами. Сравнение размеров этих фрагментов, полученных
при обработке бактериальных или плазмидных геномов (а также ДНК
хромосом эукариот), позволяет создавать рестрикционные карты, в кото-
рых отмечается локализация каждого разреза участка относительно сосед-
них участков других таких разрезов (рестрикций).
      Существенно, что многие рестриктазы вносят разрывы в обе цепи
ДНК со смещением на несколько нуклеотидов. Вследствие этого на конце
нити одного фрагмента образуется участок, нуклеотидные последователь-
                                                                   129