Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 64 стр.

     VII. УЧАСТИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ В КРУГОВОРОТЕ
                   ВЕЩЕСТВ В ПРИРОДЕ

      Микроорганизмы активно участвуют в процессах разложения орга-
нических азотсодержащих веществ, в превращении углеводов в органиче-
ские кислоты и другие продукты, в восстановлении неорганических соеди-
нений серы до сероводорода и окисления соединений железа, способствуя
круговороту веществ.

                       Лабораторная работа № 27 Получение

 накопительной культуры денитрифицирующих бактерий

      Цель работы. Освоить метод получения накопительной культуры
денитрифицирующих бактерий, методы определения нитратов, нитритов и
аммиака в среде культивирования.
      Материалы и оборудование. Микроскоп, предметные стекла, почва,
бактериологические петли, спиртовка, пинцет, скальпель, компоненты для
среды Гильтая или готовая среда в пробирках, парафиновое или вазелино-
вое масло, красная лакмусовая бумага, 1%-ный водный раствор фуксина
или генцианвиолета, дифениламин, 20%-ный раствор серной кислоты,
10%-ный раствор хлорида бария, цинк-йод-крахмал, реактив Несслера.
      Ход выполнения работы
      1. Приготовьте среду Гильтая следующего состава, г/л: лимонно
кислый калий или натрий (трехзамещенный) - 5,0; KNO3 - 2,0, KH2PO4 -
2,0; MgSO4 - 2,0; CaCO3 - 0,2; аспарагин - 1,0; FeCl3 - следы; вода водо
проводная. рН среды доведите до 6,8 - 7,2 10%-ными растворами NaOH и
HCl. Среду разлейте в пробирки высоким слоем и стерилизуйте в автокла
ве при 0,5 атм 20 мин.
      2. Поместите в пробирки со средой комочек почвы, на поверхность
среды аккуратно по стенке пробирки налейте 0,2 мл вазелинового масла для
создания анаэробных условий и инкубируйте в термостате при 30 -37 °С в
течение 1 - 2 недель. Одну пробирку оставьте незасеянной в качестве кон
троля.
64