Практикум по генетике. Самигуллина Н.С - 19 стр.

               Каждый этап обработки материала требует определенных условий во
         времени, используемых материалов для обработки. На занятии преподава-
         тель очень подробно демонстрирует все последовательные операции при-
         готовления постоянных микротомных препаратов, знакомит с необходи-
         мым оборудованием и литературой.

              Занятие 2. Выполнение работ по приготовлению постоянных
         микротомных препаратов
              Для того чтобы хорошо усвоить все операции по приготовлению по-
         стоянных препаратов студенты самостоятельно выполняют лишь некото-
         рые операции, требующие определенных навыков в работе, это: подготов-
         ка материала, фиксация его, приготовление блока, резка на микротоме,
         расправление срезов на предметном стекле и наклейка.
              Цель занятия: получить навыки по выполнению наиболее трудных
         операций по приготовлению постоянных препаратов.

                                   Методические рекомендации

                                 I. Фиксация материала
               С целью умертвления объекта с сохранением его прижизненной
         структуры проводится фиксация объекта (корешки гороха и лука) в фикса-
         торе Левитского (хромовая кислота 1% + формалин 10% в равных соотно-
         шениях по 2,5мл.). Длина корешков 0,5 – 0,7 см.

                    II. Приготовление блоков (методом закапывания)
               Выплавить объект (корешок) из парафиновой заливки горячей пре-
         паровальной иглой, приклеить на кончик иглы. Поверхность деревянного
         держателя нагреть над спиртовкой и при помощи парафиновой палочки на
         теплую поверхность нанести каплю жидкого парафина, затем без перерыва
         следующую и т.д., пока возвышение будет 3 – 4 мм. Приготовленный зара-
         нее объект перенести на возвышение и подогретой иглой установить вер-
         тикально (корешок устанавливают чехликом вверх). Продолжить закапы-
         вание горячим парафином, пока над объектом слой парафина не будет ра-
         вен 3 мм.
               Опустить блок в холодную воду, после остывания его обрезать лез-
         вием безопасной бритвы в форме правильного параллелепипеда, снять
         сверху лишний парафин, так чтобы остался слой 2 мм.

                        III. Приготовление микротомных срезов
              Приготовить микротомные срезы толщиной в 10 микрон, при этом
         ленту с ножа следует снимать мягкой кисточкой и укладывать на чёрную
         бумагу в чашку Петри блестящей стороной вверх.


                                                                             19


PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com