Практикум по генетике. Самигуллина Н.С - 21 стр.

               4.     Обезвоживание материала (выдерживание в спиртовых рас-
         творах).
               а) спирт 20 %
               б) спирт 40 % по 30 мин. в каждом
               в) спирт 60 %
               г) спирт 80 %
               В 80 % спирте материал можно оставить на ночь или на более про-
         должительный срок.
               5.     Полное обезвоживание материала
               а) спирт 96% - 1    - 1 час
               б) спирт 96% - 11 - 1 час
               в) спирт 100% - 1 - 1 час
               г) спирт 100% - 1 - 1 час
               6.     Замещение спирта на растворитель парафина
               а) 1 часть ксилола + 3 части спирта – 1 час
               б) ксилол + спирт 1:1               - 1 час
               в) ксилол + спирт 3:1               - 1 час
               г) ксилол 1                         - 1 час
               д) ксилол 11                         - 1 час
               7.     Добавляем в ксилол парафин до полного насыщения (с избыт-
         ком) – 10 мин.
               8.     Помещаем смесь в термостат в закрытом сосуде при 56-57О С
         для пропитывания материала смесью парафина и ксилола – 1 сут. (можно и
         дольше).
               9.     Открываем крышку сосуда для испарения ксилола (до исчез-
         новения запаха ксилола) – 3-6 сут.
               10. Остужаем сосуд с парафином и извлекаем «Пряник» – 10 мин.
         материал, залитый в парафин можно хранить долго.
               11. Изготовление блока – 15 мин.
               12. Получение срезов на микротоме – 10 мин.
               13. Наклеивание ленты на предметное стекло – 10 мин.
               14. Просушивание препарата при 400С не менее 12 час (можно
         при выключенном термостате хранить долго).
               15. Удаление парафина со срезов: обмываем срезы ксилолом из
         капельницы и ставим стекло на 30 мин. в ксилол.
               16. Переносим стекло в свежий ксилол на 5 мин.
               17. Удаление ксилола со срезов: обмываем срезы 96% спиртом из
         капельницы и ставим стекло на 5 мин в 96 % спирт.
               18. Промываем стекла в трех сменах дистиллированной воды – по
         5 мин.
               19. Протравливание (для лучшего окрашивания материала) – 4-6
         час в растворе 4% железоаммонийных квасцов.


                                                                             21


PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com