Практикум по генетике. Самигуллина Н.С - 22 стр.

UptoLike

Рубрика: 

22
20. Промывка в двух сменах дистиллированной воды по 5 мин.
21. Окрашивание: в растворе гематоксилина (0,1-1%) 12 час
(можно на ночь).
22. Промывка в воде 15 мин.
23. Дифференцировка (удаление лишнего красителя) срезов в 2%
растворе железоаммонийных квасцов - 5 мин.
24. Промывка препарата в воде 30 мин.
25. Обезвоживание окрашенных срезов: 96% спирт 10 мин.
100% спирт 10 мин.
26.Удаление спирта: ксилолом 1 10 мин.
ксилолом 11 10 мин.
27.Заключение в бальзам - наклейка покровных стекол 5 мин.
28.Сушка препаратов 3 суток.
29.Наклеивание этикеток на стекла с препаратами 5 мин.
Календарный план проверяется преподавателем индивидуально у
каждого студента.
Тема 4. Методика приготовления временных
«давленных» препаратов
В настоящее время разработаны ускоренные методики в микроско-
пической технике. Так, приготовление давленных препаратов не требует
той сложной обработки материала, которая обязательна при приготовле-
нии постоянных микротомных препаратов.
Давленные препараты могут использоваться при изучении митоза,
кариотипов, хромосомных нарушений в корешках и конусах нарастания
стеблей; мейоза - в молодых пыльниках различных растений.
Для приготовления давленных препаратов используют фиксатор
Карнуа уксусный алкоголь (6 частей абсолютного спирта + 3 части хло-
роформа + 1ч ледяной уксусной кислоты) или фиксатор Кларка уксусный
алкоголь (3 части абсолютного спирта + 1 часть ледяной уксусной кисло-
ты). Окрашивание препарата можно проводить различными красителями:
ацетокармином, ацетоарсеином, ацетолакмоидом, метиленовой синькой.
Чаще используют для окрашивания ацетокармин, приготовленный
следующим образом. 1г кармина растворяют в 45 мл ледяной уксусной ки-
слоты и 55 мл дистиллированной воды. Растворение ведется в колбе с об-
ратным холодильником на водяной бане в течение 30-60 минут. После ос-
тывания раствор кармина фильтруют и помещают в посуду с притертой
пробкой.
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
               20. Промывка в двух сменах дистиллированной воды по 5 мин.
               21. Окрашивание: в растворе гематоксилина (0,1-1%) – 12 час
         (можно на ночь).
               22. Промывка в воде – 15 мин.
               23. Дифференцировка (удаление лишнего красителя) срезов в 2%
         растворе железоаммонийных квасцов - 5 мин.
               24. Промывка препарата в воде – 30 мин.
               25. Обезвоживание окрашенных срезов: 96% спирт – 10 мин.
                                                       100% спирт – 10 мин.
               26.Удаление спирта: ксилолом 1 – 10 мин.
                                    ксилолом 11 – 10 мин.
               27.Заключение в бальзам - наклейка покровных стекол – 5 мин.
               28.Сушка препаратов – 3 суток.
               29.Наклеивание этикеток на стекла с препаратами – 5 мин.

              Календарный план проверяется преподавателем индивидуально у
         каждого студента.

                        Тема 4. Методика приготовления временных
                                 «давленных» препаратов

              В настоящее время разработаны ускоренные методики в микроско-
         пической технике. Так, приготовление давленных препаратов не требует
         той сложной обработки материала, которая обязательна при приготовле-
         нии постоянных микротомных препаратов.
              Давленные препараты могут использоваться при изучении митоза,
         кариотипов, хромосомных нарушений в корешках и конусах нарастания
         стеблей; мейоза - в молодых пыльниках различных растений.
              Для приготовления давленных препаратов используют фиксатор
         Карнуа – уксусный алкоголь (6 частей абсолютного спирта + 3 части хло-
         роформа + 1ч ледяной уксусной кислоты) или фиксатор Кларка – уксусный
         алкоголь (3 части абсолютного спирта + 1 часть ледяной уксусной кисло-
         ты). Окрашивание препарата можно проводить различными красителями:
         ацетокармином, ацетоарсеином, ацетолакмоидом, метиленовой синькой.
              Чаще используют для окрашивания ацетокармин, приготовленный
         следующим образом. 1г кармина растворяют в 45 мл ледяной уксусной ки-
         слоты и 55 мл дистиллированной воды. Растворение ведется в колбе с об-
         ратным холодильником на водяной бане в течение 30-60 минут. После ос-
         тывания раствор кармина фильтруют и помещают в посуду с притертой
         пробкой.


         22


PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com