Практикум по оценке качества сточных вод на кожевенно-меховых предприятиях. Шалбуев Дм.В. - 41 стр.

       Приготовление среды Эйкмона: к 1 дм3 воды добавляют 1% пептона, 0,5% глюко-
зы, 0,5% хлорида натрия. Раствор разливают в колбы и пробирки, вставляют поплавки, сте-
рилизуют тягучим паром 3 дня при 100 0С по 30 мин.
       Приготовление среды Эндо: в среду МПА (мясопептонный агар) вводят 1% лактозы
и индикатор, состоящий из 1 см3 насыщенного раствора основного фуксина, обесцвеченного
10% - ным свежеприготовленным раствором сульфита натрия. Среда безвредна. Ее разли-
вают в чашки Петри. Бактериальная культура, способна разлагать лактозу, при засеве на
среду. Эндо вызывает ее покраснение, выросшие бактериальные колонии также красного
цвета.
       Приготовление пептонной воды: к 1 дм3 водопроводной воды добавляют 10 г (1%)
пептона и 5 г (0,5) химически чистой поваренной соли. Среду подщелачивают едким натром
до слабощелочной реакции (рН 7,4 -7,5), затем кипятят, фильтруют через бумажный фильтр,
разливают в колбы или пробирки, и стерилизуют в течение 15-20 мин при давлении 0,1
МПа.
       Приготовление МПА (мясопептонного агара): к 1 дм3 МПБ (мясопептонный буль-
он) добавляют 2-3% мелко нарезанного агар-агара и расплавляют в автоклаве или текучепа-
ровом котле. После расплавления агара его охлаждают до температуры 80 0С, проверяют рН
и доводят до рН 7,4-7,6. Для просветления среды добавляют белок одного куриного яйца,
тщательно взбивают до образования пены и смешивают с двойным количеством холодной
воды. Агар помещают в автоклав или кипятят в течение 10-15 мин. Хлопья свернувшегося
белка адсорбируют все взвешенные частицы. Фильтруют агар через слой ваты в горячем
состоянии, используя для этой цели двустенную воронку для горячего фильтрования, затем
разливают в пробирки или колбы и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин при давлении
0.1 МПа.
       Приготовление среды Кесслера: к 1 дм3 добавляют 10 г пептона, 50 см3 желчи, ки-
пятят 20-30 мин, добавляют 2,5 г лактозы, доводят объем до 1 дм3, устанавливают рН 7,8-8,2
и добавляют 4 см3 1%-ного водного раствора генцианового фиолетового. Среду разливают в
пробирки по 10 см3 с поплавками и стерилизуют при 0,5 МПа в течение 15 мин. Среда имеет
фиолетовый цвет.
       Приготовление глюкозопептонной среды: среду готовят двух видов: нормальную и
концентрированную. Среда нормальной концентрации: 10 г пептона, 5 г натрия хлористого,
5 г. глюкозы, 1 дм3 дистиллированной воды. После растворения указанных ингредиентов
добавляют индикатор (2 см3 1,6 %-ного спиртового раствора бромтимолового синего или 10
см3 индикатора Андраде), устанавливают рН (7,4-7,6), разливают по 10 см3 в пробирки с
поплавками, стерелизуют в автоклаве при 112оС в течение 12 мин. Концентрированная сре-
да: количество всех ингредиентов, кроме воды, увеличивают в 10 раз.

                                  Выполнение работы

       Приготовленную среду Кесслера разливают по 500, 100, 10 и 1 см3 в колбы Эрлен-
мейера на 750, 250 мл и в пробирки, соответственно. В каждую пробирку вносят поплавок.
Среды подвергают стерилизации при 0,5 МПа. В приготовленные среды вносят по 100,0;
10,0; 0,1 и 0,1 см3 исследуемой воды. Посевы инкубируют в термостате в течение 24 ч при
температуре 37±0,5оС. По окончании термостатирования отмечают изменение цвета среды,
наличие или отсутствие газа и помутнения. Если среда не изменилась, кишечная палочка в
пробе отсутствует, исследования прекращают. Из пробирок с наличием помутнения среды и
газа проводят посев на среду Эндо. Выращивают микроорганизмы при 37±0,50С в течение
16-18 ч. При наличии колоний с металлическим блеском готовят мазки, красят по Граму и
ставят оксидазный тест. Наличие активной оксидазы для всех бактерий, высеянных из колб
(флаконов) или пробирок, свидетельствует об отсутствии кишечных палочек.
       Для определения Coli-титра в десять пробирок по 1 см3 и две колбы по 10 см3 вносят
концентрированный раствор глюкозопептонной среды и подвергают стерилизации при 0,5

                                            41