Дезинтеграция клеток в биотехнологии. Учебное пособие. Шапхаев Э.Г - 9 стр.

UptoLike

Рубрика: 

19 20
цериновую среду, которая потом продавливается через уз-
кую
( 200 мкм) щель постоянной ш
ирины. При этом клетки разрушаются под действием сил со
стороны неравномерно движущейся внеклеточной среды.
Скорость продавливания составляла около 0,1 см
3
/мин.
Концентрация глицерина и вязкость среды подбира-
ется в зависимости от давления на входе в щель, чтобы дан-
ная скорость сохранялась. Предел прочности вещества кле-
точных стенок оценивается, используя критерий макси-
мальных касательных напряжений. Были получены значе-
ния предела прочности вещества клеточных стенок Sac-
charomyces pombe равные:
на полюсе клетки σ
пр1
= 44,5 F
0
;
на экваторе клетки σ
пр2
= 95 F
е
Таблица 2.2
Методы определения упругости и прочности оболочек микробных
клеток
Метод
Инструменталь-
ная техника
Оъект
Механическая
характеристика
оболочки
1 2 3 4
Метод микроиглы:
- с контактным
взаимодействием
- с акустическими
колебаниями
- с нагревом иглы
- с генерацией мик-
ропотоков вблизи
иглы
- втягивающая мик-
ропипетка
микроманипулятор
с микроиглой
микроманипулятор
горячая микроигла
акуститечская
микроигла
микроманипулятор
с микропипеткой
выделенная оболочка
дрожжевой клетки
животная клетка
дрожжи
дрожжи, бактерии,
вирусы
эритроцит
«ригидность»
термоупругость
прочность (F
0
)
прочность моле-
кулярная
упругость
Экструзионный
метод:
- быстрая гидроэкс-
измерительный
микроорганизмы всех
1 2 3 4
трузия
- медленная гидро-
экструзия
- метод градиента
скорости в жидкости
шариковый клапан
(по Шарпи)
экструзионный
дезинтегратор
ИБФМ-1
ячейка с градиент-
ным потоком
систематических
групп, животные клет-
ки
S.pombe, E.coli
вирусы ВТМ
эритроциты
прочность (F
0
)
прочность (F
0
)
Газодекомпрессион-
ные методы:
-взрывной
-быстрый
-медленный
ударная труба,
дезинтегратор с
лопающейся мем-
браной
газодекомпрессор
бомба с медлен-
ным выпуском
газа
дрожжи, кишечная
палочка, кокки
водородные бактерии
метанокислящие бак-
терии
прочность
прочность
прочность
Фильтрационные
методы:
-с использованием
естественного по-
ристого материала
(уголь)
-с использованием
искусственного
пористого материала
стенд для испыта-
ния образцов углей
на проницаемость
эксперименталь-
ный диспергатор -
дезинтегратор
метанокисляющие
бактерии
метанокисляющие
бактерии
прочность
прочность
Методы с раздавли-
ванием клеток:
-между наковальня-
ми
-в баллистическом
дезинтеграторе
измерительная
ячейка с прозрач-
ными наковальня-
ми
планетарный де-
зинтегратор
ооцит
дрожжи S.pombe
упругость, проч-
ность
прочность, тер-
мопрочность
Метод инородных
включений с исполь-
зованием растяги-
вающей машины
растягивающая
машина с тензо-
метром
бактерии, дрожжи упругость
Метод механическо-
го резонанса
микровибратор с
перестраиваемой
частотой колеба-
ний (до 12кГц)
яйцо морского ежа упругость
Метод фотоупруго-
сти
поляризационный
микроскоп
растительная клетка
(ацетабулярия)
упругость, мо-
дуль сдвига
цериновую среду, которая потом продавливается через уз-                                                      1                    2                      3                    4
                                                                                                  трузия                  шариковый клапан     систематических         прочность (F0)
кую                                                                                                                       (по Шарпи)           групп, животные клет-
(≈ 200 мкм) щель постоянной ш                                                                                                                  ки
                                                                                                  - медленная гидро-      экструзионный
ирины. При этом клетки разрушаются под действием сил со                                           экструзия               дезинтегратор        S.pombe, E.coli         прочность (F0)
стороны неравномерно движущейся внеклеточной среды.                                                                       ИБФМ-1

Скорость продавливания составляла около 0,1 см3/мин.                                              - метод градиента       ячейка с градиент-
       Концентрация глицерина и вязкость среды подбира-                                           скорости в жидкости     ным потоком          вирусы ВТМ
                                                                                                                                               эритроциты
ется в зависимости от давления на входе в щель, чтобы дан-                                        Газодекомпрессион-
ная скорость сохранялась. Предел прочности вещества кле-                                          ные методы:
                                                                                                  -взрывной               ударная     труба,   дрожжи,      кишечная   прочность
точных стенок оценивается, используя критерий макси-                                                                      дезинтегратор    с   палочка, кокки
мальных касательных напряжений. Были получены значе-                                                                      лопающейся мем-
                                                                                                                          браной
ния предела прочности вещества клеточных стенок Sac-                                              -быстрый                газодекомпрессор     водородные бактерии     прочность
charomyces pombe равные:                                                                                                                       метанокислящие бак-
                                                                                                                                               терии                   прочность
       на полюсе клетки σпр1 = 44,5 F0 ;                                                          -медленный              бомба с медлен-
        на экваторе клетки σпр2 = 95 Fе                                                                                   ным    выпуском
                                                                                                                          газа
                                                                                                  Фильтрационные
                                                                      Таблица 2.2                 методы:
        Методы определения упругости и прочности оболочек микробных                               -с использованием       стенд для испыта-    метанокисляющие
                                                                                                  естественного   по-     ния образцов углей   бактерии                прочность
                                клеток
                                                                                                  ристого материала       на проницаемость
                                                         Механическая                             (уголь)
                  Инструменталь-
      Метод                               Оъект         характеристика                            -с использованием       эксперименталь-      метанокисляющие
                    ная техника
                                                           оболочки                               искусственного          ный диспергатор -    бактерии                прочность
          1                   2                       3                      4                    пористого материала     дезинтегратор
  Метод микроиглы:                                                                                Методы с раздавли-
-   с    контактным   микроманипулятор    выделенная оболочка         «ригидность»                ванием клеток:
взаимодействием       с микроиглой        дрожжевой клетки                                        -между наковальня-      измерительная
                                                                                                  ми                      ячейка с прозрач-    ооцит                   упругость, проч-
- с акустическими     микроманипулятор    животная клетка                                                                 ными наковальня-                             ность
колебаниями                                                                                                               ми
                                                                                                  -в баллистическом       планетарный   де-    дрожжи S.pombe          прочность, тер-
- с нагревом иглы     горячая микроигла   дрожжи                      термоупругость              дезинтеграторе          зинтегратор                                  мопрочность
                                                                                                  Метод     инородных
                                                                                                                          растягивающая
- с генерацией мик-   акуститечская       дрожжи,         бактерии,   прочность (F0)              включений с исполь-
                                                                                                                          машина с тензо-      бактерии, дрожжи        упругость
ропотоков    вблизи   микроигла           вирусы                      прочность моле-             зованием     растяги-
                                                                                                                          метром
иглы                                                                  кулярная                    вающей машины
                                                                                                  Метод механическо-      микровибратор с
- втягивающая мик-    микроманипулятор    эритроцит                   упругость                   го резонанса            перестраиваемой
                                                                                                                                               яйцо морского ежа       упругость
ропипетка             с микропипеткой                                                                                     частотой колеба-
Экструзионный                                                                                                             ний (до 12кГц)
метод:                                                                                            Метод фотоупруго-       поляризационный      растительная   клетка   упругость,    мо-
- быстрая гидроэкс-   измерительный       микроорганизмы      всех                                сти                     микроскоп            (ацетабулярия)          дуль сдвига


                                                                                        19   20