ВУЗ:
Рубрика:
Для выбора коэффициента усиления необходимо сначало найти длину
волны максимума флуоресценции, вручную изменяя длину волны регистрации.
Регулировкой усиления “ступенчато” и “плавно” добиваются нужного
отклонения в максимуме. Эту операцию проводить внимательно, чтобы
исключить зашкаливания при регистрации. Менять масштаб регистрации
можно ручкой “ступенчато”, т.к. усиление при этом изменятеся в точное число
раз.
Комбинация скоростей развертки и бумаги можно получить масштаб
спектра от 0,125 до 12нМ/мм. Наиболее удобны три масштаба: 0,5нМ/мм- 3-я
скорость развертки и “высокая”- бумаги кратно 3НН, 1,0нМ/мм 4НН,
2,0нМ/мм-4МЕ.
При проведении измерений необходимо контролировать правильность
установки режиомв регистрации, положение фильтров и заслонок. Самописец
должен стоять в поожении “servo”. Для начала записи переключатель “wave
length drive” поставить в положение “emission”, для прекращения- вернуть в
положение OFF.
ВЫПОЛНЕНИЕ РАБОТЫ
А. Исследование концентрационного тушения флуоресценции родамина
6G в водном растворе.
1. Промыть многократно кювету дистиллированной водой. Налить в нее 2 мл
воды.
2. Установить следующие режимы регистрации: щедь “возбуждения” 7нМ,
щель “флуоресценции”- 5нМ, длина волны возбуждения 530нМ, усиление
канала флуоресценции 0,3, ручка плавной регулировки на “min” скорость
регистрации 4НН. Установить “0”.
3. Снять на одном графике (один над другим) спектры флуоресценции в
интервале 500-700нМ расворов родамина следующих концентрации: 0,0, 0,5,
1,0, 2,0, 5,0, 10мг/л (удобно в воду добавлять рассчитанное количество раствора
родамина с концентрацией 10мг/л). Для возврата бумаги в первоначальное
положение пользоваться ручкой.
Проинтегрировав графики, построить зависимость интегральной
интенсивности от концентрации. Оценить концентрацию начала тушения и
среднее растояние между молекулами при этой концентрации. Молярная масс
родамина около 500г/моль.
Б. Тушение ионами иода. Измерение “излучательного” времени жизни.
1. Промыть кювету. Приготовить в ней 2 мл раствора родамина концентрацией
2мг/л.
2. Проверить нуль флуориметра. Установить параметры регистрации те же, что
и в пункте А.
3. Снять на одном графике спектры флуоресценции в интервале 500-700нМ для
следующих концентраций Kl- 0,0;0,005;0,01;0,02;0,03;0,05М. Все растворы
получаются в обной кювете добавлением 0,1М раствора.
13
Для выбора коэффициента усиления необходимо сначало найти длину
волны максимума флуоресценции, вручную изменяя длину волны регистрации.
Регулировкой усиления “ступенчато” и “плавно” добиваются нужного
отклонения в максимуме. Эту операцию проводить внимательно, чтобы
исключить зашкаливания при регистрации. Менять масштаб регистрации
можно ручкой “ступенчато”, т.к. усиление при этом изменятеся в точное число
раз.
Комбинация скоростей развертки и бумаги можно получить масштаб
спектра от 0,125 до 12нМ/мм. Наиболее удобны три масштаба: 0,5нМ/мм- 3-я
скорость развертки и “высокая”- бумаги кратно 3НН, 1,0нМ/мм 4НН,
2,0нМ/мм-4МЕ.
При проведении измерений необходимо контролировать правильность
установки режиомв регистрации, положение фильтров и заслонок. Самописец
должен стоять в поожении “servo”. Для начала записи переключатель “wave
length drive” поставить в положение “emission”, для прекращения- вернуть в
положение OFF.
ВЫПОЛНЕНИЕ РАБОТЫ
А. Исследование концентрационного тушения флуоресценции родамина
6G в водном растворе.
1. Промыть многократно кювету дистиллированной водой. Налить в нее 2 мл
воды.
2. Установить следующие режимы регистрации: щедь “возбуждения” 7нМ,
щель “флуоресценции”- 5нМ, длина волны возбуждения 530нМ, усиление
канала флуоресценции 0,3, ручка плавной регулировки на “min” скорость
регистрации 4НН. Установить “0”.
3. Снять на одном графике (один над другим) спектры флуоресценции в
интервале 500-700нМ расворов родамина следующих концентрации: 0,0, 0,5,
1,0, 2,0, 5,0, 10мг/л (удобно в воду добавлять рассчитанное количество раствора
родамина с концентрацией 10мг/л). Для возврата бумаги в первоначальное
положение пользоваться ручкой.
Проинтегрировав графики, построить зависимость интегральной
интенсивности от концентрации. Оценить концентрацию начала тушения и
среднее растояние между молекулами при этой концентрации. Молярная масс
родамина около 500г/моль.
Б. Тушение ионами иода. Измерение “излучательного” времени жизни.
1. Промыть кювету. Приготовить в ней 2 мл раствора родамина концентрацией
2мг/л.
2. Проверить нуль флуориметра. Установить параметры регистрации те же, что
и в пункте А.
3. Снять на одном графике спектры флуоресценции в интервале 500-700нМ для
следующих концентраций Kl- 0,0;0,005;0,01;0,02;0,03;0,05М. Все растворы
получаются в обной кювете добавлением 0,1М раствора.
13
