ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
165
Через 3 ч процесс хроматографирования заканчивают.
Хроматограмму высушивают и затем для локализации анализируемых
аминокислот проявляют, опрыскивая из пульверизатора, раствором
нингидрина в ацетоне. Аминокислоты обнаруживаются в виде синих
пятен.
Каждая аминокислота характеризуется относительной скоростью
перемещения R
f
которая определяется отношением
,/
pxf
llR =
где
l
Х
—
расстояние
от
линии
старта
до
центра
зоны
,
см
;
l
р
—
расстояние
,
пройденное
растворителем
от
линии
старта
до
линии
фронта
,
см
.
Для количественного определения содержания аминокислот в
анализируемой смеси строится калибровочная кривая зависимости
площади пятна (мм
2
) от количества аминокислоты (г), используемой в
качестве «свидетеля». Между количеством аминокислоты и площадью
пятна на пластинке должна существовать зависимость, выражаемая
прямой, выходящей из начала координат.
Контрольные вопросы и задачи
1. В чем сущность тонкослойной хроматографии? Каковы преимущества
тонкослойной хроматографии перед другими хроматографическими
методами?
2. Что представляет собой неподвижная твердая фаза в ТСХ? Как она
наносится на стеклянную или металлическую пластинку? Какие требования
предъявляются к твердой фазе?
3. Какие растворители используются в ТСХ? Как осуществляется выбор
растворителей?
4. Как характеризуются сорбционные свойства системы в ТСХ? Назовите
известные виды ТСХ.
5. С какой целью используются в ТСХ «свидетели» (метчики)? Как
осуществляется процесс тонкослойного хроматографирования? Как
проявляется хроматограмма?
6. Как осуществляются в ТСХ количественные определения
компонентов?
7.Дня количественного определения аминоуксусной кислоты в
анализируемом образце использовали метод тонкослойной
хроматографии. Для стандартных образцов получены следующие
результаты:
Концентрация аминоуксусной кислоты, мкг/0,01 мл 5,0 10,0
15,0
Площадь пятна, мм
2
.................... 14,1 23,6
36,2
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 163
- 164
- 165
- 166
- 167
- …
- следующая ›
- последняя »